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체 부피를 50㎕로 넣는다. (Sample × 조성)
2) 혼합된 조성을 잘 섞어준 후에 각각 PCR tube에 정량으로 분주한다.
3) 준비된 DNA template를 sample tube에 넣는다.
4) PCR machine에 넣은 후 입력된 program으로 반응을 진행한다.
<Fig 1. PCR의 일반적인 과정>
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Solubilization : inclusion body에 urea나 guanidine HCL등을 넣어주어 hydrophobic interaction을 감소시켜 뭉쳐 있는 IB를 풀어주는 방법
Refolding: IB 를 Solubilization시켜주는데 사용한 denaturant의 농도를 감소시켰을 때 자가적으로 folding되는 방법
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denaturant 와 같은 소수성 상호작용을 방해하는 시약에 의해 분리 가능.
- 시약들에 의해 추출된 내재단백질은 micelle과 비슷한 덩어리로 만들어짐.
2) peripheral membrane protein
- integral membrane protein의 친수성 영역과 지질의 극성을 띤 머리 부분에 정
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