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체 부피를 50㎕로 넣는다. (Sample × 조성)
2) 혼합된 조성을 잘 섞어준 후에 각각 PCR tube에 정량으로 분주한다.
3) 준비된 DNA template를 sample tube에 넣는다.
4) PCR machine에 넣은 후 입력된 program으로 반응을 진행한다.
<Fig 1. PCR의 일반적인 과정>
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hear : 고체를 넣고 가는 것이다.
alumina 나 fine glass 등의 보조제를 넣어, 잘 깨지게 한다.
○ nonmechanical breakage
-dessication (건조) : air drying, vacuum drying, freeze drying, solvent drying then use buffer(건조후에, buffer 이용)
세포속의 특정 효소를 얻기위해서, memb
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여 있을 가능성과 resin에 binding하지 못하고 그냥 쓸려 내려온 Taq polymerase 두 가지 경우로 예측되며, 그 양이 생각보다 많았다(약 1 ㎍). 지난 주 실험에서도 F.T.의 양이 생각보다 많았었는데, 이는 purification이 덜 진행되었기 때문에 발생하는 unde
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- 그러나 혼합 primer or mismatch를 갖는 primer를 사용할 경우는 37~45 ℃로 annealing 온도를 낮출 필요가 있다.
(3) Extension(신장반응) PCR 정의
PCR 증폭효율에 영향요인
PCR 반응조건
반응액의 조성
Taq(Taq polymerase)
Agarose gel electrophoresis
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Taq polymerase는 그 기능은 유지한다. 그리하여 PCR시 Taq polymerase를 사용한다.
우리는 35번의 cycles을 돌려 얻고자 하는 DNA를 증폭시켰다. 각 Cycle이 돌아지면서 각 과정마다 원하는 온도가 있다. 95℃에서는 주형 DNA를 변성시켜 이중나선을 풀어준
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