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lysis
◇ physical lysis by osmotic shock(삼투압), cold shock, etc
cell을 20% buffered sucrose에 넣어주면, cell안의 물이 cell 밖으로 빠져나오게 된다. 이 때 cell을 centrifugation한 후 다시, 물을 첨가하면 반대로 cell안으로 물이 들어가게 된다. 이 때 부분적으로 memb
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지는 않다고 생각하지만 supercoiled DNA만 얻기 위해서(한 개의 밴드만 표지되게 하기 위해서) tip이나 tube를 좀 더 조심하게 다뤄야 한다는 것을 느꼈고, 다음번에 또 실험 할 기회가 생긴다면 너무 충격이 가지 않도록 다루고 pipette도 능숙히 다
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제목(subject):
Plasmid DNA purification & Electrophoresis
재료 및 기구(Material and Apparatus):
배양액, cell resuspension buffer, cell lysis buffer, neutralization buffer, wash buffer, elution buffer, pipette, eppen tube, centrifugator, loading dye, spin column,
실험방법(Methods):
저번 시간
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purification
4. Dialysis
5. Bradford
6. SDS PAGE
Ⅱ 실 험
1. Cell culture
1.1 LB 배지 만들기
1.2 1,2차 Seeding
2. Harvest
2.1 Harvest
2.2 Cell lysis
3. Protein purification
3.1 Buffer 만들기
3.2 Affinity chromatography packing
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실습) / 지구문화사 / 1990 / p 96~10
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