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DNA.htm
http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_molecular/gene_cloning_14.php
http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_workshop/restriction_enzyme.php
http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_workshop/DNA_ligation.php 1. 실험제목
2. 실험목적
3. 실험원리
1) 플라스미드의 정의
2) Plasm
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Ligation - DNA나 RNA의 끝을 이어주는 과정을 가리키는 용어이다.
Ligase - Ligation 에 이용되는 효소
DNA를 기질로 사용하는 ligase를 DNA ligase, 라 한다.
- T4, E. coli ligase
RNA를 기질로 사용하는 ligase를 RNA ligase라 한다.
RNA ligase는 single strand의 DNA 또
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sphodiester결합을 촉진키는 기능을 하는 ligase를 이용하여 DNA상의 nick을 공유결합적으로 연결한다.
(3) 실험 원리
① Ligation : DNA나 RNA의 끝을 이어주는 과정을 가리키는 용어이다. 이 반응에 이용되는 효소를 ligase라 하며 DNA를 기질로 사용 하는 l
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해서 세포 속으로 DNA가 들어간 세포만을 선별하는 것을 selection이라고 한다. Vector란 무엇이며 어떤 역할을 하는가
DNA ligation이란?
DNA ligase 란?
Ligation reaction 과정
Ligation reaction에 영향을 주는 factor
ligation이 잘 안될 때?
T-vector 란?
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용하여 저번 주 실험 때에 EcoR1, Hind3로 절단해 놓았던 lambda DNA의 3‘ hydroxyl과 5’ phosphate 사이에 반응이 일어나서 이 둘이 서로 붙였다는 것을 눈으로 확인 할 수 있었다. 이는 ligation이 일어났다는 증거이다. 그리고 정확한 길이 측정을 하지않
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ligation 되었다. 반면 plasmid의 lac gene에 잘 삽입이 되면 lac fragment가 만들어지지 않아서 x-gal이 분해되지 않고 white를 띈다. 또, ligation 할 때, vector와 DNA의 ratio를 잘 맞추는 것이 중요하다. 무조건 1:1이 아니라 길이, molar 농도를 참고 해서 맞춰야
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