|
/biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_molecular/gene_cloning_14.php
http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_workshop/restriction_enzyme.php
http://blog.naver.com/malbokgi?Redirect=Log&logNo=40012962917 (1) 제한효소란?
(2) 종류와 특징
(3) Ligase 란?
(4) 종류와 특징
|
|
|
sphodiester결합을 촉진키는 기능을 하는 ligase를 이용하여 DNA상의 nick을 공유결합적으로 연결한다.
(3) 실험 원리
① Ligation : DNA나 RNA의 끝을 이어주는 과정을 가리키는 용어이다. 이 반응에 이용되는 효소를 ligase라 하며 DNA를 기질로 사용 하는 l
|
|
|
DNA ligase에 의해 틈을 메꾸어 복제가 완성됨
bacteriophage M13
RNA primer는 대장균의 RNA polymerase에 의해 합성됨
bacteriophage φX174
hairpin loop를 지니지 않음
primer는 primase에 의해 합성됨
preprimosome의 형성: n, n’, n’’, i, DnaB, DnaC로 구성
primase가 preprimosome
|
|
|
을 딴 것이다. 첫글자는 gene의 첫철자이고, 다음 두 철자들은 specles의 첫 두 철자들이다. 게다가, strain명이 때때로 포함되어진다. 마지막으로 만약 미생물의 strain가 단지 하나의 제한효소를 생산한다면, 이름은 Roman numeral 1 으로 끝난다. 만약
|
|
|
Enzyme으로 절단된 vector의 경우 self-ligation 으로 인하여 외래 DNA가 삽입되는 효율이 매우 낮다. 이 경우 어떻게 하면 외래DNA를 쉽게 삽입시킬 수 있을 지 의견을 제시해 보라.
: 양 말단이 동일한 제한효소 부위를 가지는 DNA경우 vector의 양말단도
|
|
 |
ligase가 ATP를 이용하여 nick에서 nucleotide 사이에 phosphodiester bond를 만들어 완전한 원형을 만든다. Watson, Baker, Bell, Gann, Levine, Losik // 2010년 2월 18일// 왓슨의 분자생물학 6판//p746-748
pGEM-T easy vector는 multiple cloning site에 LacZ gene이 존재한다. E. coli의
|
|
메뉴펼치기
