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용하여 저번 주 실험 때에 EcoR1, Hind3로 절단해 놓았던 lambda DNA의 3‘ hydroxyl과 5’ phosphate 사이에 반응이 일어나서 이 둘이 서로 붙였다는 것을 눈으로 확인 할 수 있었다. 이는 ligation이 일어났다는 증거이다. 그리고 정확한 길이 측정을 하지않
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DNA = f mole of DNA ends × 1μg/3000 fmol × size of DNA in bp/1000bp
(예) 2700bp 크기의 vector가 10 fmol of double stranded ends를 가지고 있다면 이에 해당하는 DNA농도(μg)는 얼마일까?
μg = 10fmol × 1μg/3000fmol × 2700bp/1000bp
= 0.009μg
* Ligation reaction에 영향을 주는 factor들
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DNA 또는 RNA 끼리 연결해 주는 효소로 5'-RACE와 같은 특수한 목적의 실험에서 사용된다 DNA ligation
map
실험목적
실험원리
Ligation 과정
ligation - DNA 분자의 결합
DNA리가제에 의한 촉매 결합반응
Blunt말단 분자에 Sticky말단 도입
어답터 분
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DNA의 말단 형상에 따라 첨가하는 효소의 양이나 반응 시간 등을 조절해야 한다. 따라서 실험을 시작하기 전에 먼저 자신이 삽입할 유전자가 blunt end 또는 sticky end 인지를 확인해야 한다.
cohesive end보다 blunt end의 결합력이 낮아서 ligation 효율이
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sphodiester결합을 촉진키는 기능을 하는 ligase를 이용하여 DNA상의 nick을 공유결합적으로 연결한다.
(3) 실험 원리
① Ligation : DNA나 RNA의 끝을 이어주는 과정을 가리키는 용어이다. 이 반응에 이용되는 효소를 ligase라 하며 DNA를 기질로 사용 하는 l
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ligation 되었다. 반면 plasmid의 lac gene에 잘 삽입이 되면 lac fragment가 만들어지지 않아서 x-gal이 분해되지 않고 white를 띈다. 또, ligation 할 때, vector와 DNA의 ratio를 잘 맞추는 것이 중요하다. 무조건 1:1이 아니라 길이, molar 농도를 참고 해서 맞춰야
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DNA정량 결과 260nm에서 흡광도는 0.176, 280nm 에서의 흡광도는 0.184로 A260/A280=0.957 이다. DNA는 UV영역인 260nm의 빛을 흡수하기 때문에 260nm의 흡광도 값을 통해 DNA의 양을 구할 수 있다. 왜냐하면 A260=1.0 일때 50μg/ml의 DNA 갖기 때문에 측정된 A260값 (0.1
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결합의 조절 . . . . . . . . . . .. . . . . . 17
8. 염색체 말단에서의 텔로머레이즈 진행 과정 . . . . . . . . . . . . . . . 19
9. 현재의 텔로머레이즈 모델. . . . . . . . . .. . .. . . . . . . . . . . . . 22
10. 텔로머레이즈와 암. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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DNA와 일치하므로 해당 연구 결과를 인간에게 적용시킬 여지가 높아진다. 앞으로 줄기세포를 이용하여 근육분화에 대한 연구가 활발해 지리라 예상이 된다. 그리하여 기존에 정복하지 못했던 근육관련 질병들을 머지 않아 극복해 낼 수 있을
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DNA염기쌍의 상보적 결합, 그 결합의 종류
♦ 반응속도에서 온도의 영향
♦ 유전자와 유전체의 차이, 액화천연가스(LPG)의 구성성분
♦ 화학반응은 첫 번째로 어떤 것이 일어나는가?
♦ 플라스틱pet의 full name은 무엇인가?
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