목차
1. DNA구조
2. 전기영동이 되는 이유?
3. 미생물배지
4. 항생제의 개념과 플라스미드를 넣는 이유?
5.solution 1,2,3 기능
6. Cell-lysis 방법 3가지
2. 전기영동이 되는 이유?
3. 미생물배지
4. 항생제의 개념과 플라스미드를 넣는 이유?
5.solution 1,2,3 기능
6. Cell-lysis 방법 3가지
본문내용
장점으로서는 간단하고 closed system 에서 실험이 진행될 수 있으므로 병원성균 실험에 유리하다. 단점으로서는 효과가 크지 않아 세포벽을 지니고 있거나 freezing을 막는 intracellular solute를 지니고 있는 경우에는 부적합하다는 것이 있다.
2)Sonication
20kHz 이상의 파장(frequency)을 쏘여줄 경우 gaseous cavitation이 형성되고 형성된 gas bubble이 깨지면서 shock가 일어나 세포가 파쇄 되는 원리를 가지고 있다. 이 방법은 세포의 농도에 무관하며 power input 나 exposure time에 영향을 받는다. 주의 사항으로서는 contact time이 증가할수록 heat, free radical, ion등이 생성되어 단백질 등을 변성시킬 수 있으므로 반드시 얼음에 고정시킨 상태에서 실험을 하여야 한다. (sonication시 buffer volume 또는 power input, exposure time이 얼마냐에 따라 virus가 deactivation되는 시간이 달라진다. )
3)Enzyme treatmentlysis buffer를 이용 시에는 detergent가 세포막으로부터 protein이나 lipoprotein을 분리시켜 세포내 물질이 유출되게 한다. 주로 bile salt나 sodium laurylsulphate, sodium dodecylsulphate, Triton등이 쓰이며, pH와 temperature에 민감하게 작용한다. 그러나 거품, 단백질의 변성, 침전들이 일어나 일반적으로 사용되지 못하는 단점이 있다.
2)Sonication
20kHz 이상의 파장(frequency)을 쏘여줄 경우 gaseous cavitation이 형성되고 형성된 gas bubble이 깨지면서 shock가 일어나 세포가 파쇄 되는 원리를 가지고 있다. 이 방법은 세포의 농도에 무관하며 power input 나 exposure time에 영향을 받는다. 주의 사항으로서는 contact time이 증가할수록 heat, free radical, ion등이 생성되어 단백질 등을 변성시킬 수 있으므로 반드시 얼음에 고정시킨 상태에서 실험을 하여야 한다. (sonication시 buffer volume 또는 power input, exposure time이 얼마냐에 따라 virus가 deactivation되는 시간이 달라진다. )
3)Enzyme treatmentlysis buffer를 이용 시에는 detergent가 세포막으로부터 protein이나 lipoprotein을 분리시켜 세포내 물질이 유출되게 한다. 주로 bile salt나 sodium laurylsulphate, sodium dodecylsulphate, Triton등이 쓰이며, pH와 temperature에 민감하게 작용한다. 그러나 거품, 단백질의 변성, 침전들이 일어나 일반적으로 사용되지 못하는 단점이 있다.
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