본문내용
Ⅰ. Title : 식물 DNA 추출
Ⅱ. Date :
Ⅲ. Name :
Ⅳ. Purpose : 실생활에서 가까이 접할 수 있는 식물(브로콜리)의 잎에서 DNA를 추출함으로써 식물 세포의 구조 및 DNA의 특성을 이해하고 추출한 DNA를 이용하여 다른 실험에 적용한다.
Ⅴ. Material
브로콜리, 99.9% 에탄올, 계면활성제, 소금, 막자사발, 마이크로파이펫, 팁, 비커, 고운 채망, 증류수
Ⅵ. Method
① 증류수 30mL에 소금 0.4g과 계면활성제 1.4mL을 넣고, 소금이 완전히 녹을 때까지 잘 섞어 소금/계면활성제액를 만든다.
② 브로콜리 약 10g을 막자사발에 넣고 가위로 잘게 자른 후 막자로 아주 곱게 간다.
③ 실험 전에 만든 소금,계면활성제액 30mL를 막자사발에 약 10분 동안 힘차게 섞으면서 갈아준다.
④ 고운체망을 사용하여 용액을 걸러 찌꺼기를 제거한다.
⑤ 브로콜리 추출액(200μl)에 99.9%의 에탄올용액(400μl)을 조심스럽게 첨가한 후 천천히 inverting한다.
⑥ 70% 에탄올용액(500μl)으로 washing한 후 원심분리(14680rpm,3분)한다.
주의 : 70%에탄올에서 오랜시간 동안 washing하게 되면 DNA가 녹아서 흩어질 수 있다.
⑦ 상층액을 버리고 DNA pellet을 완전건조(air dry)시킨 후 증류수나 TE buffer를 넣어 녹인다.
Ⅱ. Date :
Ⅲ. Name :
Ⅳ. Purpose : 실생활에서 가까이 접할 수 있는 식물(브로콜리)의 잎에서 DNA를 추출함으로써 식물 세포의 구조 및 DNA의 특성을 이해하고 추출한 DNA를 이용하여 다른 실험에 적용한다.
Ⅴ. Material
브로콜리, 99.9% 에탄올, 계면활성제, 소금, 막자사발, 마이크로파이펫, 팁, 비커, 고운 채망, 증류수
Ⅵ. Method
① 증류수 30mL에 소금 0.4g과 계면활성제 1.4mL을 넣고, 소금이 완전히 녹을 때까지 잘 섞어 소금/계면활성제액를 만든다.
② 브로콜리 약 10g을 막자사발에 넣고 가위로 잘게 자른 후 막자로 아주 곱게 간다.
③ 실험 전에 만든 소금,계면활성제액 30mL를 막자사발에 약 10분 동안 힘차게 섞으면서 갈아준다.
④ 고운체망을 사용하여 용액을 걸러 찌꺼기를 제거한다.
⑤ 브로콜리 추출액(200μl)에 99.9%의 에탄올용액(400μl)을 조심스럽게 첨가한 후 천천히 inverting한다.
⑥ 70% 에탄올용액(500μl)으로 washing한 후 원심분리(14680rpm,3분)한다.
주의 : 70%에탄올에서 오랜시간 동안 washing하게 되면 DNA가 녹아서 흩어질 수 있다.
⑦ 상층액을 버리고 DNA pellet을 완전건조(air dry)시킨 후 증류수나 TE buffer를 넣어 녹인다.
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