목차
# 미생물 검사법의 과정
1. 미생물 검체의 채취
2. 검사용 시료 조제법
(1) 시료의 예비처리
(2) 시료원액의 조제
3. 검사법의 종류
(1) 한천 평판법
(2) 직접 검경법
(3) 최확수 (MPN)
(4) 색소 환원 시험
(5) 오염 여부의 확인 검사
(6) 보존성 검사
4. 대장균의 측정
@ 검사법
(1) 유당 bouilon 법
1) 정성 시험
2) 정량 시험
(2) BGLB 배지법
1) 정성 시험
2) 정량 시험
1. 미생물 검체의 채취
2. 검사용 시료 조제법
(1) 시료의 예비처리
(2) 시료원액의 조제
3. 검사법의 종류
(1) 한천 평판법
(2) 직접 검경법
(3) 최확수 (MPN)
(4) 색소 환원 시험
(5) 오염 여부의 확인 검사
(6) 보존성 검사
4. 대장균의 측정
@ 검사법
(1) 유당 bouilon 법
1) 정성 시험
2) 정량 시험
(2) BGLB 배지법
1) 정성 시험
2) 정량 시험
본문내용
로 다음의 확정 시험을 한다.
② 확정 시험 : 가스가 생긴 발효관으로부터 1백금이를 평판감별배지에 접종하여 35~37。C에서 22~26시간 배양하든지, 또는 BGLB 발효관에 이식하여 35~37。C에서 45~50시간 배양한다.
평판 감별배지에서 정형적인 집락, 즉 Endo 배지에서는 선홍색의 집락, EMB 배지에서는 녹색의 금속 광택의 집락이 발생하는 경우, BGLB 발효관에서 가스를 발생한 것을 추정 시험 양성으로 판정한다.
③ 완전 시험 : 추정 시험에서 양성으로 나타난 정형적 colony 2개 이상에서 백금이로 개체를 각각 보통 한천 사면에 이삭하여 35~37。C에서 45~60시간 배양한다. 이 집락을 Gram 염색을 한 후, 검경을 하여 무포자간균이면 Gram 음성이 증명되면 완전 시험 양성이 된다.
2) 정량 시험
검체의 10ml, 1ml, 0.1ml를 5개씩 유당 bouillon 발효관에 접종하고, 그 후는 완전 시험의 정성 시험과 같은 조건으로 배양한다. 양성 발효관수를 세어서 최확수 표로부터 검체 100ml 또는 100g 중의 대장균수를 산출한다. 이 표는 시로 10ml, 1ml, 0.1ml 씩 접종하였을 경우의 검체 100ml 중의 대장균수를 나타내고 있으므로, 접종량이 1ml, 0.1ml, 0.01ml 일 때에는 표에서 얻은 수치를 10배로 하면 된다.
(2) BGLB 배지법
1) 정성 시험
2배의 농도의 배지를 사용할 검체에는 시로 원액의 10ml씩을 3개, 그리고 기타의 것은 검체 또는 시료 원액의 ml, 0.1ml, 0.01ml를 각 2개씩의 BGLB 발효관에 접종하고, 35~37。C에서 45~60시간 배양하여 가스 발생 여부를 관찰한다.
가스 발생이 없는 것은 대장균군 음성이 되고, 가스 발생이 있는 것은 그 발효관으로부터 한 백금이를 취하여 유당 bouillon 법 확정 시험 중 평판감별배지 시험 방법에 따라 확정 시험 및 완전 시험을 한다.
2) 정량 시험
시료를 취하는 방법은 유당 bouillon 법 중 정량 시험에 따른 것이며, 그 후의 조작은 각 발효관에 대하여 BGLB 법에 의한 정성 시험과 똑같이 하여 대장균의 유무를 조사하고 MPN 표에 의하여 최확수를 산출한다.
참고문헌
http://hukobio.com/
http://www.emco.co.kr/general.htm
http://www.labi.com/Labi2001/data/food/data/7-8-5.htm
② 확정 시험 : 가스가 생긴 발효관으로부터 1백금이를 평판감별배지에 접종하여 35~37。C에서 22~26시간 배양하든지, 또는 BGLB 발효관에 이식하여 35~37。C에서 45~50시간 배양한다.
평판 감별배지에서 정형적인 집락, 즉 Endo 배지에서는 선홍색의 집락, EMB 배지에서는 녹색의 금속 광택의 집락이 발생하는 경우, BGLB 발효관에서 가스를 발생한 것을 추정 시험 양성으로 판정한다.
③ 완전 시험 : 추정 시험에서 양성으로 나타난 정형적 colony 2개 이상에서 백금이로 개체를 각각 보통 한천 사면에 이삭하여 35~37。C에서 45~60시간 배양한다. 이 집락을 Gram 염색을 한 후, 검경을 하여 무포자간균이면 Gram 음성이 증명되면 완전 시험 양성이 된다.
2) 정량 시험
검체의 10ml, 1ml, 0.1ml를 5개씩 유당 bouillon 발효관에 접종하고, 그 후는 완전 시험의 정성 시험과 같은 조건으로 배양한다. 양성 발효관수를 세어서 최확수 표로부터 검체 100ml 또는 100g 중의 대장균수를 산출한다. 이 표는 시로 10ml, 1ml, 0.1ml 씩 접종하였을 경우의 검체 100ml 중의 대장균수를 나타내고 있으므로, 접종량이 1ml, 0.1ml, 0.01ml 일 때에는 표에서 얻은 수치를 10배로 하면 된다.
(2) BGLB 배지법
1) 정성 시험
2배의 농도의 배지를 사용할 검체에는 시로 원액의 10ml씩을 3개, 그리고 기타의 것은 검체 또는 시료 원액의 ml, 0.1ml, 0.01ml를 각 2개씩의 BGLB 발효관에 접종하고, 35~37。C에서 45~60시간 배양하여 가스 발생 여부를 관찰한다.
가스 발생이 없는 것은 대장균군 음성이 되고, 가스 발생이 있는 것은 그 발효관으로부터 한 백금이를 취하여 유당 bouillon 법 확정 시험 중 평판감별배지 시험 방법에 따라 확정 시험 및 완전 시험을 한다.
2) 정량 시험
시료를 취하는 방법은 유당 bouillon 법 중 정량 시험에 따른 것이며, 그 후의 조작은 각 발효관에 대하여 BGLB 법에 의한 정성 시험과 똑같이 하여 대장균의 유무를 조사하고 MPN 표에 의하여 최확수를 산출한다.
참고문헌
http://hukobio.com/
http://www.emco.co.kr/general.htm
http://www.labi.com/Labi2001/data/food/data/7-8-5.htm
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