항원항체반응

소개글

항원항체반응에 대한 보고서 자료입니다.

목차

1.항원-항체 반응

2.ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)

3.침강법

4.HA(hemagglutination)

5.HI(hemagglutination inhibition test)

6.Immunoblotting (Western Blot)

7.MAT (microplate agglutination)

8. 면역확산법

9.보체결합반응 실험

10.TAT (tube agglutination test)

본문내용

되고 있다.
D. 이중 면역확산법 : 겔 안에서 항원 및 항체가 함께 확산하는 방법이다.
E. 오아키법 : 우선 항체 포함한 한천을 굳힌 다음 한천만을 중층시키고 한천이 굳은 다음에 항원액을 중층하면 한천층의 중간에 침강선이 형성된다.
F. 오크터로니법 : 한천 평판에 필요한 수만큼의 작은 구멍을 만들고 여기에 항원약과 항체액을 넣으면 확산해서 두 구멍의 중간의 한천에는 침강선이 형성된다. 이 방법은 항원 또는 항체의 동정에 매우 유용하다
9. 보체결합반응 실험
면역혈청 제조법에서 설명한 바와 같은데, 세균의 항원은 위에서 설명한 침강반응과 응집반응으로 쉽게 판정이 되며 또 항보체작용이 강하므로 실제로는 보체결합반응에는 이용되는 경우가 적다.
- 항혈청준비(항체)
보통 비동기화 시키는데 항보체작용, 불안정반응, 비특이 반응 등을 제거하기 위하여 56 에서 30분 가온 처리하여 쓴다.
- 보체준비
몰못트의 혈청을 생리식염수로 10배 희석하여 쓴다. 보통 3마리 이상의 혈청을 혼합하여 쓴다. 임신한 것이나 병에 걸린 것을 쓸 수 없다.
- 적혈구 부유액 준비
산양 또는 면양의 적혈구를 보통 쓴다. 채혈한 혈액을 0.5cm직경의 유리덩어리들과 함께 플라스크에 넣고 약 3-5분 진탕하면 혈액중의 섬유소가 유리덩어리들과 함께 응괴 분리된다. 이렇게 얻어진 탈 섬유소 혈액을 침전관에 원심분리하여 상층액을 버리고 다시 처음 혈액량과 같은 양의 생리식염수를 넣고 혈구를 부유시킨 다음 또 원심분리하여 상층액을 버린다.
이 조작을 2-3회 되풀이하여 혈구를 세척한다. 이렇게 세척한 혈구 5ml에 95ml의 생리식염수를 가하여 5% 적혈구 부유액을 만든다.
- 응혈소 혈청준비
신선한 10% 적혈구 부유액을 토끼에 매회 5ml씩 4일에 한번씩 5회 주사한 다음 4일 후 시험관에 채혈하여 용혈가를 측정한 다음 이튿날 전부 채혈하여 여기서 혈청을 얻는다.
10. TAT (tube agglutination test)
◆ 방법
A. 시험관에 12개의 시험관을 세우고 번호를 붙인다.
B. 11번째 시험관을 제외한 전 시험관에 0.5ml의 식염수를 분주한다.
C. 제1시험관에 10배 희석한 가토면역 혈청 0.5ml을 넣는다.
D. 혈청을 잘 혼합하여 0.5ml을 제2시험관에 옮긴다.
E. 이러한 과정을 제10시험관까지 실시하고 제10시험관에서 0.5ml을 취하여 버린다. 이때, 제1에서 10시험관의 혈액 희석배수는 1:20에서 1:10,240이 된다.
F. 제11시험관에는 대조로 20배 희석한 면역 전 가토혈청 0.5ml을 넣는다.
G. 모든 시험관에 O항원 0.5ml을 가한 다음 흔들어 혼합시킨다. 이때 각 시험관의 최종혈청 희석은 1:40에서 1:20,480 이 된다,
H. 37도씨에서 1시간 반응시킨 다음 판독한다.
→ 양성반응은 균이 응집되어 가라앉기 때문에 상층액이 투명하며 시험관을 밑에서 바라보았을 때 균이 불규칙한 원형으로 침전되어 있다.
음성반응은 상층액이 혼탁하며 시험관을 밑에서 바라보았을 때 바닥 중간에 균이 점모양으로 약간 침전되어있다.

키워드

항원항체반응,   항원,   항체,   ELISA,   침강법,   HA,   Immunoblotting