목차
Bradford assay
- 뷰렛 시험 (biuret test)
- 분광학적 정량법
- 뷰렛 시험 (biuret test)
- 분광학적 정량법
본문내용
한다.
Ⅲ. Materials & Method
1. Experiment Implement & Materials
1) Materials
BSA, Bradford, H2O
2) Experiment Implement
spectrophotometer, tube, meas cylinder, auto pipet, poly glove, kimwipes
2. Methods
1) 각 튜브에 1ml, 0.9ml, 0.8ml, 0.7ml, 0.6ml 씩 증류수를 넣어준다.
2) 각각의 튜브에 100배로 희석한 BSA 용액을 넣어 1ml를 채운다.
3) Bradford용액을 2.5ml 씩 튜브에 넣어준다.
4) 증류수, BSA용액과 Bradford용액이 거품이 생기지 않게 잘 섞어준다.
5) 1번 용액샘플(기준용액) 을 석영 튜브에 넣어준다.
6) 1번용액 튜브를 spectrophotometer에 넣고 O.D 값을 0에 맞춘다.
7) 나머지 샘플용액들의 O.D 값을 측정한다.
Ⅳ. Result
Ⅴ. Discussion
1) BSA를 희석하여 사용하는 이유
희석하지 않았을때 O.D값은 1.765로 측정되었다.
O.D값이 0.4~0.9일 때 유효성을 가지므로 100배 희석시켜 사용한다.
희석한 용액 & 희석하지 않은 용액
2) 1% : 6.67 = x%(2배 희석한 BSA solution) : 0.635×2
∴ x = 0.1904g/100ml = 0.001904g/ml = 1.904μg/ml
→200배 희석함
1904μg/200ml = 9.52μg/ml
Ⅵ. References
- 실험생화학. 한국생화학회. 탐구당.
Ⅲ. Materials & Method
1. Experiment Implement & Materials
1) Materials
BSA, Bradford, H2O
2) Experiment Implement
spectrophotometer, tube, meas cylinder, auto pipet, poly glove, kimwipes
2. Methods
1) 각 튜브에 1ml, 0.9ml, 0.8ml, 0.7ml, 0.6ml 씩 증류수를 넣어준다.
2) 각각의 튜브에 100배로 희석한 BSA 용액을 넣어 1ml를 채운다.
3) Bradford용액을 2.5ml 씩 튜브에 넣어준다.
4) 증류수, BSA용액과 Bradford용액이 거품이 생기지 않게 잘 섞어준다.
5) 1번 용액샘플(기준용액) 을 석영 튜브에 넣어준다.
6) 1번용액 튜브를 spectrophotometer에 넣고 O.D 값을 0에 맞춘다.
7) 나머지 샘플용액들의 O.D 값을 측정한다.
Ⅳ. Result
Ⅴ. Discussion
1) BSA를 희석하여 사용하는 이유
희석하지 않았을때 O.D값은 1.765로 측정되었다.
O.D값이 0.4~0.9일 때 유효성을 가지므로 100배 희석시켜 사용한다.
희석한 용액 & 희석하지 않은 용액
2) 1% : 6.67 = x%(2배 희석한 BSA solution) : 0.635×2
∴ x = 0.1904g/100ml = 0.001904g/ml = 1.904μg/ml
→200배 희석함
1904μg/200ml = 9.52μg/ml
Ⅵ. References
- 실험생화학. 한국생화학회. 탐구당.
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