미생물학실험(활성도 측정)

목차

실험 5. 미생물의 활성도 측정

5-1 미생물 활성도(Microbial Activity)

1.실험의 목적

2.실험의 원리

3.실험의 종류

5-2 탈수소효소 활성(Dehydrogenase activity)

1.실험의 목적

2.실험의 원리

3.실험재료 및 방법

4.실험 결과

5.고찰

5-3 참고문헌 / SITE

본문내용

→
2HCOO + 3H
CHOH
→
CHO + 2H + 2e
CH + HO
→
CHOH + 2H + 2e
HS + 4HO
→
SO + 9H + 8e
NH + 3HO
→
NO + 10H + 8e
FeCO + 2HO
→
FeOOH + HCO +10H + 8e
위 표와 같이 유기물질이 수소이온과 다른 물질로 변환되는 것을 알았다.
호흡의 결과 생긴 탈수소효소와 무색의 Triphenyl-tetrazolium chloride
용액이 함께 있으면 환원상태로 있는 탈수소효소부터 수소이온이
산화상태의 Triphenyl-tetrazolium chloride용액과 결합하여 붉은색의
Triphenyl-formazan이 된다. 이 붉은색의 Triphenyl-formazan으로부터
H이온의 양을 추적함으로써 탈수소효소의 활성도를 측정, 결국 미생물의 활성도를
측정하게 되는 것이다.
실험 시작 초기 물속에 NaSO를 넣는 이유는 물속에 존재하는 용존산소를
제거하기 위하여 첨가한다. 반응식은 O + 2NaSO → 2NaSO로 되어 물속에
용존산소와 결합하여 DO를 제거하는 역할을 한다. 용존산소를 미리 제거하는
이유는 찾지 못했으나 여러 가지 추측을 해 볼 수 있었다. 먼저 다른 미생물의
분해작용으로 정확한 탈수소효소의 활성도를 측정하지 못할 것이다. 그래서
산소를 제거함으로써 다른 미생물이 탈수소효소의 활성도 측정에 관여하지
못하게 하는 것이다.
다른 추측으로는 위 표에서 보이듯이 일반적인 산화작용(O와의 반응)이 아닌
물(HO)과의 반응으로 대부분의 산화작용이 일어난다는 것이다. 이것으로
실제적 O와 반응을 최대한 억제하는 것으로 생각된다.
이번실험은 UV라는 분석기기를 처음 사용하는 실험이다 보니 기기사용법에
충분히 익숙하지 않아서 흡광도에 확실한 신뢰감을 주지는 못한 것 같다.
그리고 실험과정 마지막에 실행해야 하는 동일시료 원심분리 및 세척한 후에
glucose-glutanmate용액을 첨가해 탈수소 활성을 측정하여 시료가 갖고 있는
잠재적 탈수소 활성을 구하여 TF양 측정후 빼줘야 하나 이 부분을 생각하지
못하여 실험과정에서 빼놓게 되었다. 실험결과 수치가 10이라는 작은 수치로
작성되는 실험에 위 잠재적 탈수소 활성량을 구하지 못한 것이 정확성을 높이지
못한 또 다른 원인이라고 본다. 보다 정확하고 신뢰감 있으려면 오차범위 같은
기준이 있으면 좋을 것 같다는 의견이 모아졌다.
5-3 참고문헌 / SITE
이완구, 김남천, 1999, 하폐수분석, 동화기술, p125-126
한국미생물학회, 1998, 미생물학실험, 아카데미서적
신현성, 이규식, 2000, 일반미생물학, 형설출판사, p256
한국생물학회. 1998. 미생물학 실험서. 을유문화사. 서울
Roger Y. Stanier, L. Ingraham John, L. Wheelis Mark and R. Palnter Page, 1996, 미생물학, 아카데미서적, p80-81
http://blog.naver.com/pigger1/120006870635

키워드

활성도,   미생물,   활성도 측정