목차
Ⅰ. SUBJECT: TLC
Ⅱ. PRINCIPLE
1. 크로마토그래피(chromatography)의 개념
2. 크로마토그래피의 원리
3. 크로마토그래피의 특징
4. 박층크로마토그래피(薄層-, thin-layer chromatography) : TLC
Ⅲ. REAGENT AND APPARATUS
1. REAGENT
가. 시료물질
1) 살리실산[salicylic acid]
2) 벤질알코올[benzyl alcohol]
3) 니트로아닐린[nitroaniline]
나. 전개액
1) 핵산[核酸, nucleic acid]
2) 아세트산에틸[ethyl acetate]
2. APPARATUS
Ⅳ. PROCEDURE
Ⅴ. RESULT
Ⅵ. REMARK
Ⅱ. PRINCIPLE
1. 크로마토그래피(chromatography)의 개념
2. 크로마토그래피의 원리
3. 크로마토그래피의 특징
4. 박층크로마토그래피(薄層-, thin-layer chromatography) : TLC
Ⅲ. REAGENT AND APPARATUS
1. REAGENT
가. 시료물질
1) 살리실산[salicylic acid]
2) 벤질알코올[benzyl alcohol]
3) 니트로아닐린[nitroaniline]
나. 전개액
1) 핵산[核酸, nucleic acid]
2) 아세트산에틸[ethyl acetate]
2. APPARATUS
Ⅳ. PROCEDURE
Ⅴ. RESULT
Ⅵ. REMARK
본문내용
포화상태가 되도록 한다.
4.TLC판을 hexane: EA 를 1:1 비로 혼합한 전개제가 담긴 비커에 넣어서 전개를 시작 한다.
5.전개제가 TLC판의 위쪽 끝에서 0.5~1cm정도 떨어진 곳까지 도달하면 TLC판을 꺼내 서 말린다.
6.분석장치를 이용하거나 어떤 시료에 담갔다가 열을 가해주면 TLC판에서의 시료의 이동 경로를 알 수 있다.
7. Rf값을 측정한다.
8.다른 시료들과 비교해서 mix compound에 섞인 시료들과 미지물질을 추측한다.
9. hexane: EA를 5:1 비율로 전개제로 바꿔서 같은 방범으로 실험한다.
Ⅴ. RESULT
TLC판에는 극성이 강한 실리카겔이 씌워져 있다. hexane:EA에서 hexane은 무극성인 물질이고 EA는 극성이 강한 물질이기 때문에 두 물질이 차례로 1:1 의 비로 섞였을 때보다 5:1로 섞였을 때가 극성이 약하다. 따라서 같은 극성끼리는 서로작용 하여 전개제가 쉽게 올라간다. 두 개의 전개제가 올라가는 속도는 육안으로도 확인이 가능 할 만큼 확연한 차이를 보인다. 따라서 전개제와 함께 올라가는 시료도 1:1의 비로 섞였을 때보다 5:1의 비로 섞였을 때가 더 많이 올라간다. 각 시료들간에 올라가는 높이의비. 즉 Rf의 차가 나는 이유는 여러 가지가 있을 수 있지만 이 실험에서 Rf 차이가 나는 이유는 물질의 극성의 차이 때문이라고 볼 수 있다. 극성도가 상대적으로 큰 것은 방해를 적게 받게 되므로 먼 곳까지 빠른 시간내 에 이동 될 수 있어서 Rf값이 커지지만 반대로 다른 고정상으로 동일한 시료를 쓴다면 다른 결과가 나타날 수 있다. 결구 mix compound에는 salicylic acid benzyl alcohol nitroaniline 이 들어 있다는 것을 알 수 있다. 여기서 benzyl alcohol에 무엇인지 알 수 없는 시료가 하나 들어가 있으므로 총4가지의 시료가 들어가 있음을 알 수 있다. 미지물질은 Rf값이 salicylic acid와 동일한 것으로 보아 같은 물질이라고 추측해 볼 수 있다. 따라서 시료들간의 극성정도는 benzyl alcohol > nitroaniline > salicylic acid로 나타낼 수 있다
Ⅵ. REMARK
1. 시험과정1에서 연필로 선을 그을 때 살짝 그어야한다. 이유는 너무 세게 그으면 TLC판에 있는 실리카겔이 떨어져 나갈 수도 있기 때문이다.
2. TLC판을 손으로 잡으면 안된다. 이유는 손의 지문이 실험에 영향을 끼치기 때문에 결과가 이상하게 나올 수 있다.
3. 시약을 TLC판에 찍을 때는 여러 번 찍어 주어야한다. 이유는 결과를 확인하기 위해 UV선에 TLC판을 쬐일 때나 시약으로 확인 할 때 결과를 확실하게 확인하기 위해서이다.
4. 전개제에 TLC판을 담글 때 시계접시로 덮어 주어야한다.
5. 전개제가 몸에 닿지 않도록 한다.
이번 실험은 그동안 크로마토그래피에 대해 이름만 알고 있던 나에게 크로마토그래피란 것이 어떤 것이며 크로마토그래피를 이용해서 무엇을 할 수 있는 지 확실히 알게 해준 실험이었던 것 같다.
4.TLC판을 hexane: EA 를 1:1 비로 혼합한 전개제가 담긴 비커에 넣어서 전개를 시작 한다.
5.전개제가 TLC판의 위쪽 끝에서 0.5~1cm정도 떨어진 곳까지 도달하면 TLC판을 꺼내 서 말린다.
6.분석장치를 이용하거나 어떤 시료에 담갔다가 열을 가해주면 TLC판에서의 시료의 이동 경로를 알 수 있다.
7. Rf값을 측정한다.
8.다른 시료들과 비교해서 mix compound에 섞인 시료들과 미지물질을 추측한다.
9. hexane: EA를 5:1 비율로 전개제로 바꿔서 같은 방범으로 실험한다.
Ⅴ. RESULT
TLC판에는 극성이 강한 실리카겔이 씌워져 있다. hexane:EA에서 hexane은 무극성인 물질이고 EA는 극성이 강한 물질이기 때문에 두 물질이 차례로 1:1 의 비로 섞였을 때보다 5:1로 섞였을 때가 극성이 약하다. 따라서 같은 극성끼리는 서로작용 하여 전개제가 쉽게 올라간다. 두 개의 전개제가 올라가는 속도는 육안으로도 확인이 가능 할 만큼 확연한 차이를 보인다. 따라서 전개제와 함께 올라가는 시료도 1:1의 비로 섞였을 때보다 5:1의 비로 섞였을 때가 더 많이 올라간다. 각 시료들간에 올라가는 높이의비. 즉 Rf의 차가 나는 이유는 여러 가지가 있을 수 있지만 이 실험에서 Rf 차이가 나는 이유는 물질의 극성의 차이 때문이라고 볼 수 있다. 극성도가 상대적으로 큰 것은 방해를 적게 받게 되므로 먼 곳까지 빠른 시간내 에 이동 될 수 있어서 Rf값이 커지지만 반대로 다른 고정상으로 동일한 시료를 쓴다면 다른 결과가 나타날 수 있다. 결구 mix compound에는 salicylic acid benzyl alcohol nitroaniline 이 들어 있다는 것을 알 수 있다. 여기서 benzyl alcohol에 무엇인지 알 수 없는 시료가 하나 들어가 있으므로 총4가지의 시료가 들어가 있음을 알 수 있다. 미지물질은 Rf값이 salicylic acid와 동일한 것으로 보아 같은 물질이라고 추측해 볼 수 있다. 따라서 시료들간의 극성정도는 benzyl alcohol > nitroaniline > salicylic acid로 나타낼 수 있다
Ⅵ. REMARK
1. 시험과정1에서 연필로 선을 그을 때 살짝 그어야한다. 이유는 너무 세게 그으면 TLC판에 있는 실리카겔이 떨어져 나갈 수도 있기 때문이다.
2. TLC판을 손으로 잡으면 안된다. 이유는 손의 지문이 실험에 영향을 끼치기 때문에 결과가 이상하게 나올 수 있다.
3. 시약을 TLC판에 찍을 때는 여러 번 찍어 주어야한다. 이유는 결과를 확인하기 위해 UV선에 TLC판을 쬐일 때나 시약으로 확인 할 때 결과를 확실하게 확인하기 위해서이다.
4. 전개제에 TLC판을 담글 때 시계접시로 덮어 주어야한다.
5. 전개제가 몸에 닿지 않도록 한다.
이번 실험은 그동안 크로마토그래피에 대해 이름만 알고 있던 나에게 크로마토그래피란 것이 어떤 것이며 크로마토그래피를 이용해서 무엇을 할 수 있는 지 확실히 알게 해준 실험이었던 것 같다.
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