[생물학 실험보고서] PCR을 이용한 Virus 진단

본문내용

Abstract
이번 실험은 바이러스성 질병의 진단을 직접 해보는 실험으로서 Norovirus에 감염된 환자의 가검물로부터 PCR을 이용하여 Norovirus의 ORF2 지역을 증폭하여 Detection하는 것이다. Norovirus가 RNA를 유전물질로 가지기 때문에 Reverse transcription을 이용하여 cDNA를 제작하였으며 이를 1차 PCR 후, 2차 Semi-nested PCR을 이용하여 감도를 상승시켰다. 실험 결과, Norovirus G2-3의 ORF1과 ORF2 사이의 300 bp크기의 절편이 증폭되었으며 이를 통하여 Norovirus의 감염 및 관련된 질병의 진단을 확인해볼 수 있었다.

Introduction
PCR (Polymerase Chain Reaction, 중합효소 연쇄반응)은 특정 DNA 부위를 특이적으로 반복 합성하여 원하는 fragment를 증폭 시키는 방법이다. DNA 양이 아주 적더라도 원하는 부분을 엄청난 양과 높은 정확도로 크게 늘릴 수 있고, 장비 또한 단순하기 때문에 간단하고 짧은 시간 내에 증폭할 수 있다. PCR의 원리는 DNA의 구조에서 기인하는데 그 구조와 구성을 자세히 살펴보면 Phosphate group, Sugar, Base로 구성 되어 있고, Base의 종류는 A(adenine), G(guanine)의 Purine group과 T(tymine), C(cytosine)의 Pyrimidine group이 있는데 RNA는 T 대신에 U(uracil)을 가지고 있다. 이러한 구조에서 DNA는 Phosphate group 이 있는 쪽을 5’ 방향, Sugar 가 있는 쪽을 3’ 방향으로 하여 Double strand 가 Anti-parallel하게 이중나선을 이루게 된다.

키워드

PCR,   virus,   실험보고서,   생물학,   분자생물학