순수배양기법(자료)

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각 단계의 희석액을 20 ㎕씩 취해 spreading 한 것이다. 10-1부터 차례로 10-6까지 보면, 10-6으로 갈수록 희석 배수가 커서 콜로니의 수가 줄어드는 것을 볼 수 있다. 10-2와 10-3 그리고, 10-6의 결과를 보면 그 차이를 한눈에 알 수 있다. 10-1과 10-2은 집락수가 너무 많아 TNTC (Too Numerous To Count) 판정을 하였다. 표준평판계수의 식을 살펴보면 다음과 같다.
50은 ml의 단위를 맞춰주기 위해 곱해 주었다. 그 결과 값은 1.33×107 CFU/ml으로 나왔다. 즉, 1 ml 당 1.33×107 개의 균이 들어 있다는 결과가 나왔다.
본 실험의 순수배양기술에 이용된 획선접종법과 주가평판법은 위의 사진으로 보다시피 성공적인 결과를 나타내었다. 배지에 균을 streaking할 때는 배지 면에 상처가 나지 않도록 적당한 강도로 접종해야 하며, Spreading 또한 배지에 상처가 나지 않도록 꼼꼼히 문질러 주어야 한다(6). 또한 각 단계마다 다른 미생물에 오염되지 않도록 각별히 주의했고, 백금이의 멸균, 실험대의 청결 등의 실험 시 준수사항을 잘 지켰기 때문에 이러한 만족스러운 결과를 가져올 수 있었다고 본다. 화염 멸균한 백금이를 사용할 때, 백금이를 식히지 않고 그대로 균을 fishing하면, 균은 protein으로 되어 있으므로 열에 의해 응고되어 죽게 되므로 백금이는 충분히 식힌 다음 사용해야 한다. 균을 배양할 때에도 공중 낙하균의 방지와 응축수가 떨어지는 것을 방지하기 위해 거꾸로 뒤집어 배양해야 한다(6). 사소하지만 아주 중요한 이와 같은 조작들을 잘 숙지하고 실험을 수행하여야 성공적이며 확실한 미생물 실험을 수행할 수 있다.
요 약
집식 배양된 배양액은 아직 순수하지 못하며 각종 잡균이 함께 존재하므로 목적 균을 얻으려면 순수분리법의 조작을 반복해야 한다(2). 순수 배양된 균이여야만 미생물의 형태나 기능에 대한 올바른 지식을 얻을 수 있기 때문이다(1). 이중 본 실험에서 사용한 방법은 획선접종법과 주가평판법이다. 실험대상인 균을 단일 콜로니로 분리해 내기 위해서 다른 균들에 의해 오염되거나 서로 섞이지 않도록 유지, 보관, 멸균하는 것이 중요하다(3).
참고문헌
1. 유민, 김병오, 이혜영. 미생물 실험서. 보문각. p. 25 (2012)
2. 오계헌, 강형일, 소재성, 송홍규, 이병욱. 최신 미생물실험. 신광문화사. p. 70 (2010)
3. 고하영, 이준우. 이론 식품미생물학. 광문각. pp. 223-228 (2005)
4. 서승교, 이웅수. 미생물실험법. 동문각. pp. 7-9, 55-57, 68-69 (2005)
5. 미생물학 실험교재 편찬위원회. 미생물학 실험. 월드 사이언스. pp. 27-28, 30-31 (2000)
6. 유주현, 변유량. 식품 미생물학. 효일. pp. 224-225 (2007)
7. 김영지, 김왕준, 남진식, 배지헌, 손규목, 정승원, 조갑연, 조덕봉, 조석금, 채기수. 식품미생물학. 지구문화사. p. 19 (2007)

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순수배양기법(자료),   획선접종법,   주가평판법