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성량에 따른 Lipase의 Activity를 구하는 실험이다. 일반적으로 효소의 반응속도와 반응물의 생성 속도는 시간에 따라 감소한다. O.D값은 시간에 따라 증가하는 값이 줄어들었고, 추가로 몰농도를 통해 효소의 Activity를 구할 수 있다. 커니컬 튜브
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activity (U/mgenzyme )를 계산한다.
※ 실험 시 유의사항
- p-NPB는 광분해될 수 있으므로 호일로 감싸야 한다.
- 흡광도 측정할 때 UV-Vis spectrophotometer에 외부 빛이 들어가지 않도록 한다.
- Sampling할 때 정확한 흡광도 측정을 위해 cuvette에 지문이 묻지
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activity (U/mgenzyme )를 계산한다.
※ 실험 시 유의사항
- p-NPB는 광분해될 수 있으므로 호일로 감싸야 한다.
- 흡광도 측정할 때 UV-Vis spectrophotometer에 외부 빛이 들어가지 않도록 한다.
- Sampling할 때 정확한 흡광도 측정을 위해 cuvette에 지문이 묻지
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activity를 불활성화시킨다. DEPC처리는 매우 효과적인 방법으로, RNA와 접촉할 solution을 처리하는 데에 유용하다. Ambion의 DEPC-treated water는 packing 전에 한 번, 후에 한 번 모두 autoclave를 하여, 확실한 멸균 처리 및 DEPC의 완전한 inactivation을 보장한다
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ㄴㄴ
이다.
7. 고찰(Discussion)
- 위 실험에서는 온도에 따른 Lipase의 변성과 함께 Activity의 차이에 대해 실험하였다. 예상했던 결과로 Lipase의 구성은 단백질로 이루어져 있고, Lipase는 60℃, 30분간 변성이 일어났다. 그 결과 Activity의 차이에서는 약
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