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pcr과정 중의 높은 열에서도 견딜 수 있어 많이 사용된다.
-References
-20120405 DNA isolation.pptx
-PCR(polymerase chain reaction).ppt
-전기영동_(electrophoresis).ppt
-핸드폰 사진
-http://blog.naver.com/hongmsoo?Redirect=Log&logNo=150016260288
http://blog.yahoo.com/consistency1222/articles/1
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실험방법
1. plasmid isolation(Ammonium acetate 법
2. DNA Restriction (Vector 제작
3. pS44 DNA restriction
4. Electrophoresis
5. PCR (polymerase chain reaction
6. Elution ;Gene clean kitⅢ(Bio101
7. Ligation
8. Competent cell 제조 (DH5α) - CaCl2 법 사용
9. Transformation (H
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DNA 4㎕
37\'C incubator에서 1시간 반응 후
10x loading buffer (2㎕)를 사용하여 전기 영동
5.실험 결과
6.고찰
이번 실험을 통하여 PCR을 통한 Gene cloning을 배웠다.
Gene cloning으로 DNA을 자르고 붙이고 변형시켜서 실험에 필요한 재조합 recombinant DNA을 제조하
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-플라스미드 분리
-원심분리기
원심분리기는
-아가로스
3. 실험준비물
1)소모성 재료
2)기기
4. 실험방법
1)Plasmid mini prep kit을 이용한 정제
2)아가로스 젤 만들기
3)전기영동
3)DNA 확인
5. 실험결과
6. 고찰
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DNA 분리(1~50kb), DNA 유무 확인
Ⅵ. 참고 문헌 (Reforence)
네이버 지식백과, PCR [polymerase chain reaction], 생명과학대사전
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=2694811&cid=60261&categoryId=60261#__datalab
다음 블로그, 안녕하세요 ~!!, [스크랩] 전기영동(Electrophoresis), 감
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DNA에 오염되었나, 즉, DNA의 순도를 확인할 수 있는데 실험 결과 A260/A280의 비는 0.957로 순수한 DNA로 여겨지는 1.8보다 훨씬 작다. 따라서 DNA에 단백질이 불순물로 많이 섞여 있다고 결론지을 수 있다.
전기영동을 이용하여 단백질과 DNA의 크기를
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DNA mar
ker를 이용하여 검정할 수 있다는 결론도 얻었다.
5. References
- 농림수산식품부(2008) 수박ㆍ멜론의 품종 지문화 연구 및 순도검정 마커 개발. 연구보고서 3-84
- 이계동(2003) 수박 F1 종자 순도 검정을 위한 DNA Marker 개발. 한경대 산업대학원
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경우 효소에 의해 다시 잘려, agarose gel로 전기영동 하였을 때 vector와 insert, 이렇게 2 band로 나오는 것을 이용한 것이다.
DNA
10㎕
10×H buffer
2㎕
NdeⅠ
1㎕
XhoⅠ
1㎕
DDW
6㎕
total
20㎕
다시 PCR로 확인해 보았다.
premix에 다음과 같이 넣고 PCR을 했다.
DNA
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PCR의 기본 원리
Watson, Baker, Bell, Gann, Levine, Losik // 2010년 2월 18일 // 왓슨의 분자생물학 6판//p746-748
Watson, Baker, Bell, Gann, Levine, Losik // 2010년 2월 18일 // 왓슨의 분자생물학 6판//p748 Abstract
Introduction
Materials and Methods
Results
Discussion
Disc
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연구계획서
⑬석사?박사 진학시 희망 연구분야 및 연구계획
⑭학부, 대학원 이수 전공과목 중 관심과목
⑮석사?박사 이후의 계획(박사진학,취업,유학 등)
비 고(기 타)
연 구 실 적 목 록(논문, 보고서, 연구참여 등)
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