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DNA의 이동을 바로 확인할 수 있다.
DNA의 이동속도가 15% 늦어진다.
전기영동시 EtBr이 없으면 Sharp한 band를 얻을 수 있다.
DNA의 형태에 따라 EtBr의 결합정도가 달라져서 natural한 pattern을 보기 어렵다.
전기영동 tank 및 gel tray가 EtBr에 오염된다
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DNA와 primer간에 annealing이 일어나게 한다. Annealing temperature는 primer의 길이와 염기 조성에 따라 다른데, 대략 55℃ 내외가 일반적이다. Annealing 다음에는 Taq DNA polymerase의 최적 활성 온도인 72-74℃에서 DNA 합성을 일어나게 한다. 이상의 cycle을 20번
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Taq polymerase는 들어 갈 때 아지랑이처럼 나타나는 것을 확인하여 들어갔는지 유무를 확인 했다. 그리고 PCR을 한 후 전기영동으로 확인했다. 한 부분의 단편 DNA의 증폭을 한 것이기 때문에 전기영동 결과가 하나의 밴드만 진하게 형성이 되어야
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DNA template that contains the DNA region (target) to be amplified.
Two primers that are complementary to the 3' (three prime) ends of each of the sense and anti-sense strand of the DNA target.
Taq polymerase or another DNA polymerase with a temperature optimum at around 70 °C.
Deoxynucleosi
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1. Title: DNA sample PCR
2. materials: 2㎕ PCR buffer, 0.4㎕ dNTP(0.1㎕ each of dATP dCTP dTTP dGTP), 0.2㎕ primer (10㎕ each of primer, 0.1㎕ Taq polymerase, 16.3㎕ DW, 1㎕ template DNA, micro pipette, tip, micro tube
3. Purpose:
1) ds-DNA separation: high temperature (90도 이상) ss-DNA 로 분
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