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6) Ethidium bromide는 DNA 이동속도를 15% 정도 감소시킨다.
7) 전기영동 완충용액의 성분과 이온강도도 전기영동 속도에 영향을 준다.
*DNA loading dye
아가로즈의 well에 DNA를 넣어줄때 DNA용액을 무겁게 하여 아가로즈의 홈으로 가라앉하는 역할을
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1. title: colony에서 추출한 DNA의 electrophoresis
2.materials: PCR된 MASTER MIX, 전기영동 기기, 전원공급장치, 50 x TAE 용액, 팁(tip), 마이크로피펫(micropipette), loading dye, DNA, size maker, agarose gel
3.purpose: PCR된 DNA template를 전기영동을 통해 PCR의 결과를 확인 할
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loading dye와 DNA를 섞은(1:5정도) solution을 주입한다.
5. 전기를 걸어준 뒤 20~30분 기다린다
6. DNA가 내려오면 자외선 하에서 확인한다.
* 낮은 전압에서 선형으로 된 DNA조각의 이동속도는 부하되는 전압에 비례한다. 그러나 전기장에서 전류의 흐름
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DNA 농도 측정
3) DNA electrophoresis
Plamid DNA sample, 50X TAE(tris-acetate-EDTA) buffer – tris base 242g, acetate acid 57.1ml, 0.5M EDTA 100ml, DW 1ml, Elution buffer, agarose 0.5g, 1kb DNA ladder(size marker),DNA loading dye (bromophenol blue, xylene cyanol FF, Glycerol), EtBr, UV
3.
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DNA 농도 측정
3) DNA electrophoresis
Plamid DNA sample, 50X TAE(tris-acetate-EDTA) buffer – tris base 242g, acetate acid 57.1ml, 0.5M EDTA 100ml, DW 1ml, Elution buffer, agarose 0.5g, 1kb DNA ladder(size marker),DNA loading dye (bromophenol blue, xylene cyanol FF, Glycerol), EtBr, UV
3.
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DNA-PEI complexes를 제거한다.
4.IEX-EBA Chromatography
chromatography하기 앞서 loading하는 용액이 equilibration 단계의 buffer A와 같은 조건이 되도록 diafiltration step을 거친다. Chromatography는 buffer A로 equilibration 시킨 후 발효 액을 loading 한다. Elution 시켜주기
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