목차
1. 실험목적
2. 실험원리
3. 실험재료 및 방법
1) 실험재료
2) 실험기기 및 장비
3) 실험방법
4. 결과
5. 고찰
6. 참고문헌
2. 실험원리
3. 실험재료 및 방법
1) 실험재료
2) 실험기기 및 장비
3) 실험방법
4. 결과
5. 고찰
6. 참고문헌
본문내용
이번 실험에서는 세포를 harvest하고 보고자 하는 단백질이 sample내에 얼마나 포함되어 있는지 Bradford assay로 정량화 한다. Standard curve를 그리고 sample 내 단백질 농도를 예측한 뒤 원하는 농도로 western blot sampling까지 진행할 수 있다.
보고자 하는 단백질을 정량하기 위한 과정은 크게 cell harvest, cell lysis를 진행한 뒤 Bradford assay와 같은 정량법을 통해 sample내 단백질 농도를 파악하는 것이다. 먼저 Cell harvest한 후 저속 rpm으로 원심분리하여 pellet에 모인 cell을 풀어준 뒤 lysis buffer를 처리한다. Cell lysis 반응시간이 지난 뒤 고속 rpm으로 원심분리하여 supernatant에 존재하는 단백질을 취한다. 이후 이미 농도를 알고 있는 BSA 단백질을 standard로 잡고 sample에 단백질이 얼마나 들어있는지 그래프와 식을 통해 계산한다.
보고자 하는 단백질을 정량하기 위한 과정은 크게 cell harvest, cell lysis를 진행한 뒤 Bradford assay와 같은 정량법을 통해 sample내 단백질 농도를 파악하는 것이다. 먼저 Cell harvest한 후 저속 rpm으로 원심분리하여 pellet에 모인 cell을 풀어준 뒤 lysis buffer를 처리한다. Cell lysis 반응시간이 지난 뒤 고속 rpm으로 원심분리하여 supernatant에 존재하는 단백질을 취한다. 이후 이미 농도를 알고 있는 BSA 단백질을 standard로 잡고 sample에 단백질이 얼마나 들어있는지 그래프와 식을 통해 계산한다.
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