총 탄수화물 분석

목차

1. 탄수화물

2. 글루코오스

3. 탄수화물의 분류

4. 당류의 일반반응
(1) Molisch반응(α-naphthol반응)
(2) Anthrone반응

5. 환원당의 반응
(1) Fehling반응
(2) Benedict반응
(3) Tollens반응(은경반응)
(4) Phenyl hydrazine반응 (Osaazone생성)

6. 단당류와 2당류의 식별반응
(1) Barfoed반응

7. Aldose와 Ketone의 식별반응
(1) Seliwanoff반응(Resorcinol반응)
(2) Pinoff반응

8. Hexose 반응
(1) Chromotropic acid 반응

9. Pentose 반응
(1) Bial 반응
(2) Phloroglucinol 반응

10. 기타 특수한 검출반응
(1) Raybin 반응
(2) Naphthoresorcin 반응
(3) Mucic acid 생성반응

11. 분광광도계(Spectrophotometer)
(1) 분광광도계의 구성
(2) 분광광도계의 사용법

본문내용

도법에서는 시료를 희석하여 몇㎎％이하로 사용할 때가 많으므로 용매를 잘 정제하여야 한다.
2) 셀(Cell, cuvette)
시료를 넣는 셀은 자외부에서는 석영셀을 사용하고 가시부에서는 유리셀을 사용한다. 셀의 내외부에 먼지나 지문 등이 묻지 않도록 주의하여 측정하여야 한다. 석영제 셀은 고가이므로 파손되지 않도록 주의하여 사용한다.
셀의 세척시 알콜롸 에테르의 혼합액(4：1)을 면에 적시어 가볍게 닦아내면 된다.
3)대조용액
대조용액(맹시험액)은 시료용액 중에서 착색부분만을 제외하고 다른 모든 조건들은 시료용액과 동일하여야 한다. 용매가 증류수이거나 시약이 무색일 때에는 증류수를 대조용액으로 사용할 수 있다. 그러나 목적하는 착색성분 이외의 다른 착색성분이 시료용액에 들어있는 경우에는 대조용액에도 이를 첨가해야 한다.
4)흡수극대파장
착색성분의 용액을 백색광선이 통과하는 경우에 그 성분에 의하여 어떤 파장의 광선이 가장 예민하게 흡수될 때의 파장을 흡수극대파장 이라한다. 흡수가 잘 안되는 파장에서 측정한다면 농도의 변화에 따른 투과도의 차이를 볼 수 없어 정량이 불가능하게 된다. 흡수파장은 분자의 결합상태, 분자 및 원자단 종류 등에 따라 차이가 나므로 그 중에서 흡수극대 파장을 선택하여 흡광도법으로 검량곡선을 이용하여 그 물질을 정량할 수 있다.
5)자외선 스펙트럼
파장을 나타내는데 사용하는 단위는 nanometer(1㎚=10-7㎝)이며, 자외선과 가시광선의 파장은 적외선의 파장보다 짧다. 가시광선스펙트럼은 약 400㎚(자색)에서 750㎚(적색)에 걸쳐 있으며 자외선스펙트럼은 100㎚에서 400㎚범위이다.
흡수되는 자외선 또는 가시광선의 파장은 전자전이 형태에 따라 좌우되며 자회선이나 가시광선 복사에너지는 둘 다 적외선 복사에너지보다 크다. 전자 전이에 큰 에너지를 필요로 하는 분자들은 긴 파장을 흡수한다. 어떤 시료에 의한 복사에너지의 흡수는 여러 파장에서 측정되며 기록계에 의해 스펙트럼으로 나타나는데 그림 2-10에 전형적인 자외선스펙트럼을 나타내었다.
분자에 의한 에너지 흡수는 양자화 되어 있기 때문에 전자 전이에 대한 흡수는 불연속적이 파장에서 선 또는 예리한 피크의 스펙트럼으로 관측 될 것으로 예상되나 실제로 측정하면 그렇지가 않다.
자외선 또는 가시광선 스펙트럼은 넓은 범위의 파장에 걸쳐서 폭넓은 흡수띠들로 나타난다. 이러한 이유는 분자의 바닥상태와 들뜬상태의 에너지준위들은 모두 회전 및 진동하는 부준위들로 세분되어지기 때문이다 전자전이는 바닥상태의 한 부준위에서 들뜬상태의 한 부준위로 일어나는데 이들 다양한 전이에너지의 차이는 아주 작기 때문에 흡수 파장 역시 조금밖에 차이가 나지 않아서 폭넓은 흡수띠가 나타나게 되는 것이다
어떤 물질은HPLC에서 분석할 때 미리 자외선스펙트럼을 측정하여 흡수극대파장을 알아야만 그에 맞는 칼럼을 선택하여 좋은 결과를 얻을 수가 있다.
또한 산화되기 전의 지질과 고온 및 산소에 의해 산패된 지질의 자외선 스펙트럼을 각각 측정하면 양자간에 흡수극대파장의 변화가 일어난 것을 알 수 있다.

키워드

탄수화물,   식품분석,   글루코오스,   Molisch반응,   Anthrone반응,   검출반응,   분광광도계