[생물학실험] 환원당의 측정 및 원리

소개글

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목차

1. Subject

2. Object

3. Principles

4. Procedure

5. Reference

본문내용

용한다.
2) 방법
① 환원당으로서 0.1g～1.0g의 당을 함유하는 시료(물에 용해하는 시료는 정확한 양을 취하 고, 고체시료는 정확한 양을 취하여 유발에 옮겨서 물을 가하고 죽 상태로 마쇄한다.)를 정 확히 취하여 250㎖의 메스플라스크에 옮긴다.
② 물을 가하여 약 100㎖로 하고 혼합한 후 중성 초산납포화용액을 침전이 그 이상 생기지 않을 때까지 가한다(보통 2㎖정도). 시료 중 단백질이 함유되어 있으면 Fehling용액으로 당을 정량할 때 방해작용이 크기 때문이다. 한편 dextrin이 많은 시료는 alcohol로 침전시 키고 여별하여 사용하면 된다.
③ 혼합하고 물을 가하여 전량을 250㎖로 한다. 이때의 침전을 여과지로 여과하고 여액에 무 수수산나트륨(Na2C2O4)의 분말을 소량씩 그 이상 침전이 생기지 않을 때까지 가하여 납 을 완전히 수산납(PbC2O4)으로서 침전시킨다.
④ 침전은 다시 여과지로 여과하여 시료 당용액을 조제한다.
(2) Dinitrosalicylic acid에 의한 비색법
1) 시약
① A용액 : 4.5% NaOH용액 300㎖에 1% 3,5-dinitrosalicylic acid용액 880㎖를 혼합하고, 이 혼합액에 Rochelle염 255g을 용해한다.
② B용액 : 10g의 결정 phenol을 10% NaOH 용액 22㎖에 용해하고, 물을 가하여 100㎖로 하고, 이 용액 69㎖에 NaHSO3 6.9g을 녹인다.
③ A용액과 B용액을 혼합하고, 갈색병에 넣어 보존한다. 이 시약은 약 1년간 안정하다.
2) 방법
① 25㎖ 메스플라스크에 시료 당용액 1㎖(시료 희석액 1㎖중에 당 0.2～2㎎ 함유)와 시약 3 ㎖를 가한다.
② 그리고 끓는 수욕 중에서 5분간 끓인 다음 냉각한 후 물을 가하여 25㎖로 채운다.
③ 시료대신에 물 1㎖를 같은 방법으로 처리한 것을 공시험으로 하여 두께(내경)2.5㎝ 또는 1㎝ cuvette에 넣어 575㎚의 파장에서 흡광도를 측정하여 미리 준비해 둔 표준곡선에서 당의 양을 구한다. 발색한 후에는 한 시간 이내에 흡광도를 측정하는 것이 좋다.
④ 표준곡선은 특급 무수포도당(glucose)을 alcolol로 재결정하여 건조하고, 0.2～2㎎/㎖의 용액을 만들어 위와 같은 방법으로 흡광도를 측정하여 만든다.
(3) 계산
시료중의 환원당량은 다음 식에 의해 계산한다.
A : 표준곡선으로부터 구한 시료용액중의 환원당의 양(㎎)
D : 희석배수
S : 시료채취량(g)
5. Reference
(1) 식품분석. 김관우 외 3인 저. 진로연구사. 2002, 105～113pp.
(2) 식품분석. 이근보, 양종범, 고명수. 유한문화사. 2002, 169～178pp.
(3) 식품분석. 장현기, 정동효 저. 형성출판사. 1999, 196～212pp.
(4) 식품분석학. 채수규 외 5인 저. 지구문화사. 1999, 374～377pp, 385～440pp.
(5) 식품분석화학. James. C. S. 저. 우자원 역. 광문각. 2001, 91p, 185～187pp.

키워드

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