식품화학 단당류의 정량분석과 정성분석

소개글

식품화학 단당류의 정량분석과 정성분석에 대한 보고서 자료입니다.

목차

단당류의 정량분석과 정성분석


정량분석
1.Glucose oxidase법
2.DNS법
3.Phenol-sulfuric acid법
4.Picric acid법

정석분석
1. Anthrone 시험
2. Fehling 시험
3. Molish 시험
4. Benedict 시험
5. Barfoed 시험
6. Bial 시험
7. Seliwanoff 시험
8. 무스산 생성시험
9. 오사존 시험
10. 다당류에 대한 요오드 시험

본문내용

ltose 용액농도(μg/ml)
25
50
75
100
흡 광 도
0.1630
0.3780
0.5257
0.7303
정석분석
1. Anthrone 시험
원리
Anthrone반응도 당류의 공통된 정색반응의 하나로서,진한 H2SO4 에 의해 탈수되어 형성된 furfural 및그유도체가 anthrone과 반응하여 청녹색의 착색물질을 만든다. 이 반응은 매우 예민(2r - glucose/㎖)하여 당류의 비색정량에도 이용된다. 당류 이외의 유기화합물은 갈색을 나타낸다.
시약
① 0.5% 당용액
② Anthrone 시약 : Anthrone(10-keto-9,10-dihydroanthracene) 0.1~0.2g을 진한 H2SO4 100g 에 녹인 용액이다. 이 용액은 시간의 경과에 따라 암색화되므로 사용하기 직전에 만들어야 하며 갈색병에 넣고 냉장고에 저장한다.
측정방법
시료당용액의 물로 약 10배로 희석하고,그 1㎖를 시험관에 취하여 anthron 시약 2㎖를 가하여 잘 흔들면 투명한 녹색이 된 다음에 암록색으로 된다. 이 반응은 glycerol 이나 furfural 에서도 나타난다.
방법도시
2. Fehling 시험
원리
카르보닐기의 환원성에 의해 일어나는 반응으로서 설탕과 같은 비환원성당은 반응을 하지 않는다. 실험관 밑부분에 생기는 적색의 침전은 산화제1동(아산화동)으로 아래의 식에 표시된 반응에의해서 생긴다. 한편 A액,B액을 취할 경우에는 각기 다른 피펫을 사용해야 한다.
시료,시약,실험방법
3. Molish 시험
원리
단당류는 진한 H2SO4에 의하여 탈수반응을 일으켜 furfural 유도체로 되며,이것이 α-naphthol 과 반응하여 자색 또는 청자색의 착색물질을 형성한다. 소당류 및다당류는 H2SO4에 의해 glycoside결합이 끊어짐으로써단당류로 변한 다음에 단당류와 같은 착색물질을 만든다. 이 정색반응은 탄수화물 뿐만 아니라 진한 H2SO4에 의하여 furfural 또는 furfural 유도체로 변할 수 있는 다른 유기화합물에서도 공통적으로 일어난다. 단, glucuronic acid는 녹색의 착색물질을 만들며, glucosamine 및 chitin은 Molisch 시험에 음성이다. 이 반응의 반응식은 다음과 같다.
시 약
① 0.5% 당용액 : xylose,glucose,fructose,maltose,sucrose,lactose,
전분의 각 수용액
② 진한 H2SO4
③ α-naphthol 시약 : 분말상의 α-naphthol 5g을 95% ethanol에 녹여 100㎖로 한다. 사용하기 직전에 만들고 갈색병에 저장한다.
측정방법
시료당용액 1~2㎖를 시험관에 취하고,이것에 α-naphthol 시약 2~3방울을 가하여 잘 섞은 후 시험관벽을 따라 진한 H2SO4 2~3㎖를 조심스럽게 가하면,잠시후 시료층과 황산층의 경계면에 적자색의 환이 생성된다(이때 흔들어서는 안된다). 시험관을 흐르는 물에 냉각하면서 조용히 흔들어 액을 혼합하면 전체액은 적~청자색으로 된다. 불순한 진한 H2SO4 는 α-naphthol과 반응하여 녹색을 나타내며,당용액대신에 증류수를 사용하여 위와 같은 조작을 하여 검정을 해볼 필요가 있다.
방법도시
4. Benedict 시험
원리
시트르산 나트륨 173g과 무수 탄산나트륨 90g을 약 600ml 온수에 용해시켜 여과지를 통과하여 전 용액을 850ml가 되게 한다. 한편 결정 황산동 17.3g을 물 100ml에 용해시켜서 이것을 위의 용액에 소량씩 교반하면서 혼합하여 전 용액이 1L가 되도록 한다. 이 시약은 장기 보존이 가능하다.
반응 원리 : 베네딕트 용액 내에서 Cu 는 알칼리 용액에서 Cu(OH)를 형성하고 이 것이 환원당과 반응하여 적갈색의 산화동(CuO )의 침전물을 만든다.
시약
1%포도당, 과당, 맥아당, 설탕 용액
실험방법
Benedict 시약 5ml에 당액 약 8방울을 가하여 혼합하고 약 2분간(water bath 중에는 약 3분간) 가열하여 냉각한다. 환원당의 량에 따라 적, 황 녹색의 침전이 생긴다.
5. Barfoed 시험
원리
Barfoed 용액은 약한 산성을 나타내므로 2분 가열로는 이당류는 Cu을 CuO 로 환원시키지 못하나 단당류는 Cu를 환원시킨다. 그러므로 이 반응으로 단당과 이당을 구별할 수 있다. 단 2분 이상 가열시 이당류도 가수분해되어 양성반응을 나타내게 되므로 반응시간에 정확을 기해야한다.
시료
10%포도당, 맥아당, 설탕용액
시약, 실험방법, 비고
6. Bial 시험
원리
오탄당은 진한 염산과 함께 가열하면 푸르푸랄로 변하며 이는 Fe3+ 존재하에서 3,5-dihydroxytoluen과 축합되어 청록색의 물질을 만든다. 그러나 이러한 발색반응은 오탄당에 특이한 반응은 아니며 육탄당도 진한 염산과 함께 오랫동안 가열하면 Hydroxymethyl 프르푸랄로 되어 이것 역시 3,5-dihydroxytoluen과 축합되어 황갈색을 띤 물질을 만들게 된다. 따라서 색상의 구별을 통해 오탄당과 육탄당의 구분을 할 수 있다.
7. Seliwanoff 시험
원리
Ketose는 일반적으로 aldose에 비해 염산에 의해 더 빨리 탈수반응을 일으켜 푸르푸랄 유도체가 되고 이것이 m-dihydroxybenzene과 반응하여 붉은색의 혼합물이 만들어진다. Aldose도 염산에 의해 푸르푸랄 유도체가 생성되므로 가열시간에 주의하여야 한다.
8. 무스산 생성시험
원리
단당류 / 이당류는 진한 질산에 의해 잔화되어 Aldaric acid가 되며 Galactose에서는 Mucic Acid가 생긴다. Muric Acid는 질산에 대한 용해도가 아주 작아서 곧 침전을 만들거나 특이한 모양의 결정으로서 석출되므로 Galactose를 확인할 수 있다.
9. 다당류에 대한 요오드 시험
녹말(Starch) = amylopectin(80%) + amylose(20%)
Amylopectin + 요오드 용액 → 적자색
Amylose + 요오드 용액 → 청자색
검정 방법
스포이드로 묽은 요오드 용액을 검정할 용액에 1~2 방울씩 떨어뜨려서
색깔의 변화를 본다.
10. 오사존 시험
시료, 시약, 실험방법, 비고

키워드

식품화학 ,   정량분석,   정성분석,   단당류,   Glucose oxidase,   DNS법,   Anthrone 시험,   Fehling 시험