단백질 전기영동 (예비보고서)

소개글

단백질 전기영동 (예비보고서)에 대한 보고서 자료입니다.

본문내용

되어있는 gel 아래쪽의 흰색 스티커를 제거한 후 전기영동 장치에 장착한다. (스티커 제거하지 않으면 작동하지 않음.)
Gel 위의 comb를 버리고 움직이지 않게 고정 장치(흰색)를 한다.
Running buffer를 gel이 있는 칸에는 가득 채우고, 그 위의 부분에는 2/3정도 높이까지 채운다.
준비되어 있는 sample과 marker(BPB)를 중앙에 조심히 넣는다. (gel이 찢어지지 않도록)
전기영동장치에 전선을 연결하고 power supply의 스위치를 켠 후에 전압, 또는 전류를 일정한 정도에 고정시킨다. (150V, 67mA, 10W)
전기영동이 시작되면 푸른색의 sample이 gel의 하단에서 1cm정도 될 때까지 스위치를 끄지 않는다.
전개가 끝나면 전압스위치를 최소로 조정한 후 전원을 끔.
전기 영동장치로부터 접속한 전선을 분리시킨 후 상부 영동조액을 폐액통에 버린 다음 slab를 분리한다.
(4) Coomassie에 의한 착색 및 탈색
영동조에서 분리한 slab에서 gel을 분리시킨 후 착색용 용기로 gel이 찢어지지 않도록 조심하면서 옮긴다.
Gel을 적어도 5배 부피에 해당하는 staining solution이 들어있는 플라스틱 용기에 담근 후 30분 동안 shaker에 올려놓는다.
착색이 끝난 gel은 꺼내어서 증류수로 2~3회 가볍게 세척한 후 destaining solution에 담아 탈색시킨다.
→ 이번실험에선 탈색과정을 따로 거치지 않고 착색 후 증류수에 넣어 전자레인지에 5분 정도 돌리기만 한다.
Gel을 전자레인지에서 꺼내 흰 종이 위에 올려 결과를 확인한다.

키워드

electrophoresis,   단백질 전기영동,   예비보고서,   실험보고서