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단백질 정제법. 안용근. 양서각. 1994. 63~70쪽
(2) 실험생화학. 한국생화학회. 탐구당. 1986. 230~231쪽, 255~257쪽
(3) Chemistry Principles & Reaction. Masterton & Hurley. Saunders College Pub. 333~337쪽
(4)http://100.empas.com/entry.html/?i=42522&
(5)http://moolynaru.knu.ac.kr/everyday_scien
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거의 이용되지 않고 후자의 polyacrylamide 겔 전기영동 등이 많이 이용된다. 1) 원심 분리
2) 염석과 투석
3) 겔 여과 크로마토그라피
4) 이온 교환 크로마토그라피(ion-exchange chromatography)
5) 친화 크로마토그라피
6) 전기 영동
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정제된 단백질의 순도 검정
정제한 단백질의 순도를 확인 하는 일은 여러 가지 방법을 사용할 수 있다. 이곳에서는 다음의 5가지로 요약하고자 한다.
1) 고정된 특이활성을 가지는 경우를 확인 할 수 있다. 특이 활성이라 함은 단백질 단위 mg당
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정제된 단백질의 순도 검정
정제한 단백질의 순도를 확인 하는 일은 여러 가지 방법을 사용할 수 있다. 이곳에서는 다음의 5가지로 요약하고자 한다.
1) 고정된 특이활성을 가지는 경우를 확인 할 수 있다. 특이 활성이라 함은 단백질 단위 mg당
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이후에 AutoZero를 눌러 그래프의 영점을 맞춰준다. AutoZero를 이용하면 곡선으로 불안정한 그래프의 영점을 잡아주게 된다. 실험결과 그래프에서 노란색 점선이 영점을 잡아준 선이다. FPLC기계는 3가지로 시료의 흐름을 결정할 수 있는데 Waste, Lo
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없다. 미지 시료를 확인하기 위해서는 반드시 이미 확인된 같은 표준 화합물을 동시에 전개시켜 확인해야 한다.
Rf값 계산
크로마토그래피의 분류 ■ 목적
■ 이론
■ 종이 크로마토그래피의 원리
■ 종이 크로마토그래피의 방법
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tting
Tag결합단백질(P177)
Reocombinant protein 정제: His-Tag
Protein Purification
EGFP and GFP
Blotting ?
Principles of Western blotting
RNA interference (RNAi) technology
His-Tag
SDS-Page
Southern blotting
Northern blotting
Western blotting
A. structure of siRNA, B. mechanism of RNA-
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1. Date
28 April 2006
2. Subject
정제된 단백질의 SDS-PAGE 분석
3. Object
정제된 단백질의 SDS-PAGE를 분석하기 위한 방법인 western blotting에 대한 지식을 익힌다. 단백질을 membrane으로 전사하기 위한 kit제작 방법을 배운 다음 gel transfer를 하여, 단
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주제 : 단백질 분리정제 및 기능분석
실험일시 : 2008년 3월 11일 2:00p.m.~ 4:30p.m.
목적 : Column chromatography의 준비로서의 buffer만들기
실험목표 : 1M의 Tris-HCl (pH7.4), NaCl, MgSO4 Stock solution을 제조한 후 다양한 NaCl 농도의 elution buffer를 만든다.
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Protein purification
4. Dialysis
5. Bradford
6. SDS PAGE
Ⅱ 실 험
1. Cell culture
1.1 LB 배지 만들기
1.2 1,2차 Seeding
2. Harvest
2.1 Harvest
2.2 Cell lysis
3. Protein purification
3.1 Buffer 만들기
3.2 Affinity chromatography packing
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