[생명과학실험] Tris-HCl Buffer 만들기 - 단백질 분리정제 및 기능분석 : Column chromatography의 준비로서의 buffer만들기

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[생명과학실험] Tris-HCl Buffer 만들기 - 단백질 분리정제 및 기능분석 : Column chromatography의 준비로서의 buffer만들기에 대한 보고서 자료입니다.

목차

Tris-HCl Buffer 만들기 - 단백질 분리정제 및 기능분석


주제 : 단백질 분리정제 및 기능분석
실험일시
목적
실험목표
실험도구

Introoduction

Buffer solution
Osmotic shook and Dialysis
Heat Denaturation and Ion-exchange Chromatography
Alkaline Phosphatase(AP)
Method
Result
Discussion
References

본문내용

주제 : 단백질 분리정제 및 기능분석

실험일시 : 2008년 3월 11일 2:00p.m.~ 4:30p.m.

목적 : Column chromatography의 준비로서의 buffer만들기

실험목표 : 1M의 Tris-HCl (pH7.4), NaCl, MgSO4 Stock solution을 제조한 후 다양한 NaCl 농도의 elution buffer를 만든다.

실험도구 : pH 미터기, Tris 가루, HCl, 증류수, 마그네틱 바, stirier, spatula, pipette (1ml), 메스실린더 (50ml이상), 비커, 전자저울, 비닐장갑, 기름종이, 50ml튜브



▪ Introoduction

▪ Buffer solution
　Buffer solutions는 적은 양의 산이나 염기를 첨가하거나 희석시킬 경우, 용액의 H+와 OH- 의 농도 변화를 줄이기 위해 사용하는 용액이다. Buffer solutions는 약산과 그것의 짝염기로 이루어진 것이 일반적이며, 약염기와 그것의 짝산으로 이루어진 경우는 전자보다 적다. 용액의 pH변화에 저항하는 buffer solutions의 기능은 앞서 말한 약산과 그 짝염기의 평형에 의한 결과로, Le Chatelier의 공통이온효과에 의해 설명될 수 있다.
　　　　　　　　　　　　　　HA(aq) + H2O(l) → H3O+(aq) + A−(aq)




≪ … 중 략 … ≫




▪ Method

① 먼저, 1M Tris-HCl (pH7.4)용액 50ml을 만들기 위한 Tris가루의 질량을 계산한다.
　(Tris 분자량 : 121.14)
　<<계산>> 1M x 0.050L x 121.14g = 6.057g
② 메스실린더에 증류수를 약 30ml정도 담아놓는다.
　(Tris 가루와 HCl을 더 넣어주어야 하기 때문에 부피의 변화가 있을 것이므로 정확한 실험을 위해 물을 필요한 부피보다 적게 넣는다.)

키워드

Column chromatography,   단백질,   Buffer solution,   분리정제,   pH 미터계,   Osmotic shook,   buffer만들기,   단백질 분리정제,   몰농도,   변성