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동결 바이알에 1ml씩 옮긴다.
스티로폼에 바이알을 넣고 deep freezer에서 하루 정도 둔다.
질소탱크로 옮겨 보관한다.
* 동결시키는 cell의 density는 106cells/ml보다 높아야 한다.
6. 동결세포의 해동
해동 과정에서도 동결과정에서와 마찬가지의 기
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cell 의 관찰 - 여성 자궁암 세포
4. Sarcoma180 [싸: 코마 180] - 마우수 복수암 세포 1. Purpose
2. Korean Cell Line Bank(한국세포주은행)
가. 동결세포주 배양법
나. 단층세포 배양법
다. 부유세포 배양법
3. HeLa [휠: 라] cell 의 관찰 - 여성 자궁암
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신에 글리세롤을 첨가하는 일도 있지만 DMSO가 보다 효과적이다. 일반적인 동결배지의 조성은 20%혈청과 10%의 DMSO를 첨가한 기본 합성배지이다. 무혈청배양한 세포를 무혈청으로 동결보존하기 위해 만든 무혈청 배지가 있다.
동결배지를 포함
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동결과 다르게 해동은 신속하게 해야 한다.
② DMSO를 제거하기 위해 배지를 첨가하여 원심분리를 한다.
③ 액체질소가 튀기거나 묻지 않도록 주의한다.
(3) 이론
- 해동을 할 때에는 천천히 하면 세포내에 수분이 들어가서 재결정화 되므로 37℃
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세포 손상을 막아주고 세포내 얼음 결정 형성을 억제한다.
4.2.3. Vial을 분당 -1℃씩 천천히 냉동 시킨다.
4.2.4. Deep freezer 1일 보관 후 액체질소통으로 옮겨 장기 보관한다. 1. 동결세포의 해동 (Thawing)
2. 세포 수 측정 (Cell counting)
-Hemocytome
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세포공격
rm & H_2 O^+ ~+~H_2 O ~~ -----→ ~ H_aq+^+~ +~.OH#
rm & e^-~ +~ H_2 O ~~ -----→ ~ e_aq^-#
rm & e_aq^- ~~ ------→ ~ .H~ +~ OH_aq^-~~~ 등
. 희석효과
. 산소효과
. 보호효과
. 온도효과 (동결효과)
▣ 사람에 있어서의 급성증상
선량 (rad)
증 상
비 고
25
50
100
거의 무
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