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Electrophoresis kit
3. 실험 방법
① 1% agarose gel을 준비한다.
0.5X TAE 50ml에 0.5 g을 넣고 끓인 후, 틀에 붓고 30분간 굳힌다.
② DNA 용액 10ul에 6X loading dye 2ul를 섞어 gel에 loading 한다.
lane 1 : Size marker
lane 2-n : DNA
③ 전기영동 100V, 40분
④ EtBr 용액에 gel을 2
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직임은 더욱 느려지므로 작은 DNA 분자까지 분리할 수 있게 된다. 아래의 여러 농도의 아가로스 겔에서 전기영동한 DNA 크기 표지자(ladder)들을 나타낸 다음 장의 그림을 보면 알 수 있듯이 1.5%와 1% 아가로스겔에서는 0.1kb의 DNA까지 분리가 되어
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겔의 매질로부터 간섭 없이 보다 간단하게 검출할 수 있다.
(6) 면역 전기영동
어떤 분리기법의 분리력은 만약 검출 또는 가시화의 어떤 특이한 형태로 병합된다면 크게 개선될 수 있으며 그 일례가 면역 전기영동(immunoelectrophoresis)법이다. 한
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전기영동 된 정도를 알 수 있게 하는 역할을 한다.
*전기영동 buffer
TAE (Tris acetate EDTA) : DNA 분자량이 큰 경우, agarose electrophorsis에서 쓰인다.
TBE (Tris borate EDTA) : DNA 분자량이 작은 경우, DNA sequencing에 쓰인다.
Commonly used electrophoresis buffers
Buffer
Con
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전기영동을 충분히 시켜준다.
UV를 쪼일수록 DNA가 파괴되므로 UV를 최소화 시켜야 한다.
gel size가 비슷하지 않으면 balance가 맞지 않으므로 최대한 겔의 크기를 비슷하게 맞추어야 한다.
참고문헌
PMC, 실리카 표면에대한DNA흡착 및 용출: 아미노
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전기영동용 한처유래 아가로즈의 제조 및 DNA 분리특성」, 한국식 품과학회지 Vol.31, No.1, 도정룡, 오세육저, 한국식품과학회, 1999, p110-114.
-http://kin.naver.com/db/detail.php?d1id=11&dir_id=110205&eid=hRLCh+1aFbi3Sk8wm 5HOWnbPLZGgytYq&qb=RE5BwMcgwaS3riDD+MGk
-http://blog.naver
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