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3.실험목적
본 실험에서는 spectrophotometer를 이용하여 HRP(horseradish peroxidase)에 의한 기질의 변화를 측정하여, 효소 반응속도론의 기본이 되는 Michaelis?Menten 방정식을 이해한다.
효소 반응속도론(enzyme reaction kinetics)
단일 기질-효소 촉매반응의
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효소 활성을 효소의 질량으로 나눠주어야 하지만 이번 실험의 경우, 효소의 질량을 모르기 때문에 효소의 활성만을 구해주었다.
시간 (min)
농도 (mM)
효소활성 ()
1
0.0005405
0.0297
20
0.003459
0.00952
30
0.006324
0.0116
40
0.007730
0.01063
Table 3. 시간에 따른 pN
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높은 흡광도 측정 실험을 할 것이다.
5. Reference
[1] 2018년도 2학년 2학기 실험노트
[2] 단백질 정량 실험 예비레포트
[3] 분석화학, 제 8판, Daniel C. Harris, 자유아카데미, page 439 1. Abstract
2. Experiment
3. Result & Discussion
4. Conclusion
5. Reference
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실험을 진행해야 한다.
3. Result
실험의 결과 각 시간에 따라 UV-Vis spectrophotometer로 측정한 p-NPB의 흡광도 값은 다음 Table 1. 과 같다. 실험의 초기값은 1min으로, calB 효소를 넣고 1분 뒤에 흡광도를 측정하였다. 또한 실험의 대조군은 0.5 mM pNPB 용액
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buffer 90ul + 0.35mM H2O2 100ul
Control : assay buffer 10ul + working buffer 90ul + 0.35mM H2O2 100ul
6. Standard curve를 그리고 공식에 따라 sample의 Gpx 의 농도를 구한다. 1.주제
2.재료 및 기구
3.실험목적 및 원리
4.실험방법
5.실험결과
6.고찰
7.참고문헌
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결과 및 고찰)
1. 단백질과 DNA의 정량 결과
2. 단백질과 DNA의 정량 결과
3. LDH의 활성 측정 결과
4. Gel filtration chromatography를 이용한 LDH 단백질의 정제 결과
5. Ion exchange chromatography를 이용한 LDH 단백질의 정제 결과
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