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Agarose gel electrophoresis ＆ Gel elution
전기영동
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• 용액에 전류를 통했을 때 용액 중의 하전 입자가 양극 또는 음극으로 이동하는 현상
• 주로 단백질 관련 물질 또는 유사한
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끼 워서 well을 만든다.)
3) 전기 영동 장치에 1 x TAE를 넣은 후 gel을 넣는다.
4) well의 가장 왼편에 size maker를 넣고 차례로 loading dye와 DNA를 섞은(1:5 정도) solution을 주입한다.
5) 전기를 걸어준뒤 20~30분 기다린다
6) DNA가 내려오면 자외선하에서 확
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판형 겔 (c)와 (d) 불연속 완충용액 시스템을 이용한 원통형 겔과 판형 겔
4.참고문헌
http://urizip.x-y.net/b-electrophoresis.htm
http://my.netian.com/%7Ejeojoon/elec.htm
http://dasan.sejong.ac.kr/%7Eyjlee/p-agarose%20gel.htm 1.실험원리
2.실험순서
3.고찰
4.참고문헌
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전기영동최신프로토콜” 출판사: 월드사이언스 강호일 저
http://www.essencemedical.com/seb3-3/electrophoresis.htm
http://www.komabiotech.com/etc/cool/electophoresis.htm
http://www.kordic.re.kr/~trend/Content234/chemistry03.html
http://biochemisty.yonsei.ac.kr/biochem_workshop/agarose_gel.htm
http
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효과는 단백질이 고유pH에서 순 영전하로 된다. Ⅰ. Introduction.
2. 전하에 미치는 pH의 영향
3. Agarose gel electrophoresis
[Agarose gel 전기영동시 DNA의 이동에 영향을 주는 요인들]
4. 실험설계
Ⅱ. Materials
Ⅲ. Method.
Ⅳ. Result.
Ⅴ. Discussion.
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갔을 경우 효소에 의해 다시 잘려, agarose gel로 전기영동 하였을 때 vector와 insert, 이렇게 2 band로 나오는 것을 이용한 것이다.
DNA
10㎕
10×H buffer
2㎕
NdeⅠ
1㎕
XhoⅠ
1㎕
DDW
6㎕
total
20㎕
다시 PCR로 확인해 보았다.
premix에 다음과 같이 넣고 PCR을 했
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전기영동 이동거리로 분석한 결과와 일치한다.
agarose gel은 polyacryamide보다 큰 통로를 가지고 있어 분자량이 큰 DNA를 분리하는데 적합하기 때문에 DNA 크기 측정에 이용된다. DNA 전기영동도 단백질의 전기영동과 마찬가지로 큰DNA가 작은 DNA보다
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asmid가 가진 항생제 내성을 가질 수 있다. 따라서 항생제 배지에서 키움으로 써 plasmid가 숙주에 잘 들어갔는지 확인할 수 있다. 우리 실험에서 pGEM-T easy vector는 ampicillin에 내성이 있기 때문에 LB agar 배지에 ampicillin을 깔고 conformation된 E. coli들을
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