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효소의 사용
@ DNA 조작 효소의 종류
@ DNA를 절단하는 효소들 - 제한효소
@ 제한효소의 발견과 기능
@ 형태 Ⅱ 제한효소
@ 제한효소 이용, 절단 실험시 고려할 사항
@ 제한효소 비활성화 방법(효소파괴)
@ 전기영동
@ 표준 전기영
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구가 필요하며 사용하는 기구에 따라 반응시키는 방법들이 다양하게 제시되어 있다.
ISPCR은 세포내의 target sequence를 증폭시키는 것으로부터 반응이 시작되며 세포막을 통해 여러 물질(예: PCR 용액에 들어 있는 salt 등)들이 쉽게 이동할 수 있
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효소의 최적온도는 37도지만 5도이하에서는 활성을 거의 나타내지 않기 때문에 Tm값과 최적온도 사이의 절충한 온도로서 cohesive end의 ligation은 12-15도에서 실시한다.
2) ionic concentration
3) DNA end type(cohesive or blunt)
4) relative concentration of DNA end
* blunt
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Cloning, 전기영동 실험을 계획.
블로팅과 유전자치료에 관심을 가지게 됨.
배경지식(
플라스미드란?
벡터란?
왜 플라스미드를 벡터로 가장 많이 이용하는가?
클로닝이란?
클로닝과정
열 충격법
전기 천공법
식물세포의 클로닝
서던
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클로닝 입문,4판, 1. 주제
2. 실험목적
3. 실험원리(서론)
■ 제한효소
1) Type I restriction enzyme
2) Type II restriction enzyme
3) Type III restriction enzyme
■ 제한효소를 이용한 DNA의 절단
■ 전기영동 ( electrophoresis )
■ DNA 정량
(1) DNA의 농
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cloning and DNA analysis An Introduction, T.A.Brown, Fourth Edition
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