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영양 생화학 실험
1. 주제 RT(Reverse Transcription)-PCR , PCR (polymerase chain reaction)
2.
재료
및
기구 기구 PCR, mini centri, PCR tube, e.p tube, incubator, micro pipette, glove, ice box.
시약 1) RT-PCR
DEPC, RNA sample, oligo dT, RT buffer, dNTP, RT enzyme., Thermal Cycler
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DNA를 합성.
1-3.PCR의 이용
PCR의 이용
밝혀진 유전자의 검출
임상검사-암세포 유무의 진단
감염증-병원체 존재의 진단
태아의 성별 진단
법의학-개인의 특징 확인 1. PCR
2. RT-PCR
3. Real time-PCR
4. PCR의 응용
5. Western blot
6. 출처
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섞고 에탄올 600㎕과 3M Sodium acetate 30㎕을 넣고
centrifuge 한 다음 9㎕를 취해서 10x Loading dye 1㎕을 넣고
spin down 시킨다음 전기영동 시켰다.
9. 자외선 촬영으로 결과를 관찰하였다.
3.Result
RT-PCR
맨 왼쪽 size marker 500~600bp 사이 위치에 밴드들이 보였
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RT-PCR Normalization” (Tang et al, 2007)에서는 β-actin은 PCR 증폭에 용이한 길이와 GC 함량을 가진 유전자로 소개하고 있다. 이를 통해 β-actin은 쉽게 측정 가능하며 House keeping gene으로서 적합하다고 생각할 수 있다.
Ⅴ.참고 문헌
·Kong et al, 2014, Identific
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있다.
전기영동으로 RNA를 분리하는 방법은 denaturing agent에 따라 Glyoxal / DMSO(Dimethyl sulfoxide) 방법(McMaster & Carmichael, 1977)과 formaldehyde 방법(Rave et al, 1979)으로 나눌 수 있다. 각각의 장단점은 있지만, 여기서는 formaldehyde에 의한 것을 설명하였다. Tran
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