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주제 : 단백질 분리정제 및 기능분석
실험일시 : 2008년 3월 11일 2:00p.m.~ 4:30p.m.
목적 : Column chromatography의 준비로서의 buffer만들기
실험목표 : 1M의 Tris-HCl (pH7.4), NaCl, MgSO4 Stock solution을 제조한 후 다양한 NaCl 농도의 elution buffer를 만든다.
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50ml인 것을 이용해 연립방정식을 풀면 표를 채울 수 있다.
30mM
NaCl
100mM
NaCl
150mM
NaCl
200mM
NaCl
Elution
Buffer A
aml
aml
aml
aml
Elution
Buffer B
bml
bml
bml
bml
Total
Volume
50ml
50ml
50ml
50ml
①aml10mM+bml1000mM=50ml30mM
a+b=50
a=48.99, b=1.01
②aml10mM+bml1000mM=50ml100mM
a+b=50
a=45.45,
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1. Date
31 March 2006
2. Subject
단백질 분리정제 및 기능분석: 개요 및 column chromatography 준비
3. Object
단백질을 분리정제 및 기능분석을 하기 위해 몰 농도와 Buffer 용액에 대한 개념을 익히고, column chromatography를 작동시키는 데에 필요한 Buffer 용액
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만들기
1.2 1,2차 Seeding
2. Harvest
2.1 Harvest
2.2 Cell lysis
3. Protein purification
3.1 Buffer 만들기
3.2 Affinity chromatography packing
3.3 Sample 준비
3.4 Sample loading
3.5 Resin washing
3.6 Sampling
4. Dialysis
4.1 Buffe
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Chromatography
◆ LPLC
◆ HPLC · FPLC
◆ Affinity chromatography
◆ Ion-exchange chromatography
◆ Gel filtration
◆ 역상 chromatography
◆ 소수성 chromatography
◆ Electrophoresis
◆ 등전점 electrophoresis
◆ SDS-PAGE, 2D-PAGE
4. 참고문헌(Reference)…
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