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주제 : 단백질 분리정제 및 기능분석
실험일시 : 2008년 3월 11일 2:00p.m.~ 4:30p.m.
목적 : Column chromatography의 준비로서의 buffer만들기
실험목표 : 1M의 Tris-HCl (pH7.4), NaCl, MgSO4 Stock solution을 제조한 후 다양한 NaCl 농도의 elution buffer를 만든다.
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50ml인 것을 이용해 연립방정식을 풀면 표를 채울 수 있다.
30mM
NaCl
100mM
NaCl
150mM
NaCl
200mM
NaCl
Elution
Buffer A
aml
aml
aml
aml
Elution
Buffer B
bml
bml
bml
bml
Total
Volume
50ml
50ml
50ml
50ml
①aml10mM+bml1000mM=50ml30mM
a+b=50
a=48.99, b=1.01
②aml10mM+bml1000mM=50ml100mM
a+b=50
a=45.45,
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1. Date
31 March 2006
2. Subject
단백질 분리정제 및 기능분석: 개요 및 column chromatography 준비
3. Object
단백질을 분리정제 및 기능분석을 하기 위해 몰 농도와 Buffer 용액에 대한 개념을 익히고, column chromatography를 작동시키는 데에 필요한 Buffer 용액
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단백질을 결합시킨 column에 서서히 염 농도를 증가시켜 단백질을 용출한다. 특징은 대표적인 chromatography로 단백질의 처리능 및 분리능이 모두 높아 저압 chromatography의 초기 정제 및 중고압 chromatography에 의한 최종단계의 정제에 적용되고 있다.
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chromatography), 얇은 막 크로마토그래피(thin layer chromatography) 등이 있다.
② Ion-exchange chromatography
이온교환 chromatography(ion-exchange chromatography)는 column chromatography의 한 종류로 gel 여과 chromatography와 병행한 일반적인 정제방법이며, 가용성 단백질
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단백질과 DNA의 정량
A. SDS-PAGE를 이용한 단백질의 전기영동과 분자량 측정
B. Agarose gel을 이용한 DNA의 전기영동
3. LDH의 활성 측정
4. Gel filtration chromatography를 이용한 LDH 단백질의 정제
5. Ion exchange chromatography를 이용
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단백질(50%)을 구해냈고 나아가 α-Amylase(8.7%)의 조성비율까지 찾아냈다. 따라서 Eq. 2는 각각 α-Amylase(8.7%), CPs(41.3%), cell debris(49%), DNA(1%) 임을 구하였다. DNA-PEI complex를 효율적으로 제거 하기 위하여 원심분리를 한다. 1 서론 /6
1.1 α-Amylase
1.2
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column 을 사용할 수 있기 때문에 분리능이 크다는 것과 정지상과 이동상 사이에 시료의 성 분이 확산속도가 크므로 분석시간이 비교적 짧다는 것이다.
단점 : ① 검출기는 모든 시료성분에 대하여 동일하게 정량적으로 감응해야한다. 그러므
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분리가 어렵다는 문제가 새로 발생했지만 공정에서 발생하는 문제를 해결하는 능력을 기를 수 있었습니다.
이후 바이오 공정 전반에 대해 알고 싶어 '바이오화학제품 제조 기사' 자격증을 취득하였습니다. 취득 과정에서 upstream process 내 여러
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