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-20℃에 보관한다.
결과
토의
솔루션 I안의 glucos는 삼투압을 유지시켜주면서 세포의 외형을 유지시키단 II를 넣어 주면 용액이 중화되면서 플라스미트 DNA가 renature되고 되지 못한 크로모좀 DNA는 원심분리한후 침전이 되고 제거를 하는데 원심
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: 2 ~ 2.5 volume
final 0.3 M sodium acetate, pH 5.2 :
commonly used
final 0.2 M sodium chloride
DNA containing SDS
final 2 M ammonium acetate
triphosphate removal
inhibits T4 polynucleotide kinase and TdT
final 0.8 M lithium chloride
RNA precipitation, very soluble in ethanol
inhibits rever
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조심스럽게 에탄올을 버린다.
27. ice-cold 70% 에탄올 1ml를 첨가하고 섞는다.
4도에 15분동안 15000rpm으로 원심분리한다.
28. 작은 알들이 생성이 되지 않도록 조심스럽게 에탄올을 버린다.
29. 마지막으로 에탄올을 빼서 말리고 몇 분동안 클린벤치
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ute DNA, add 50 μl of Buffer EB to the center of each QIAprep spin column, let stand for
1 minute and spin for 1 minute
16) mix 2 μl of miniprep DNA and 8 μl of sterilized DDW with 2 μl of 6X loading
→ Total 12 μl!!
17) load onto an agarose gel
18) gel electrophoresis (~100V) for about 20 minute
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, 이들을 전기영동하면 같은 염기서열의 같은 크기
DNA라도 이동하는 거리가 제각기 다릅니다.
Size marker로 쓰는 짧은 DNA는 linear form입니다.
이렇게 전기영동으로 size를 비교할 수 있는 DNA는
linear form DNA 뿐입니다. Alkali lysis method
miniprep
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