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DNA가 일련의 pasmid DNA pGEX6P-1이 나오는지를 관찰하는 실험이다. pGEX6P-1 과 geneX는 BamH1과 Xho1으로 잘려진 형태로 존재한다. 그래서 다음과 같은 Plasmid가 존재하는 Com.cell이 존재할 수 있다.
정상적인 결합
(pGEX6P-1 + GeneX)
GeneX끼리 결합
pGEX6P-1끼리
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pGEX-4T-1 vector의 restriction map이다. <13> 여기서 ssbp1가 삽입된 plasmid라고 생각하고 더블컷(EcoR I와 Pst I를 처리해준다)을 했을 때 나오는 밴드를 아래의 format에 그려보겠다. EcoR I이 처리되면 삽입되어 있던 ssbp1이 잘려 나오고, pGEX-4T-1 vector의 Ec
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DNA와는 별도로 존재하기 때문에, plasmid DNA 분리는 염색체 DNA가 포함되지 않게 분리하는 방법이 사용된다.
Ⅵ. 참고 문헌 (Reforence)
나노헬릭스, Reliable Partner for DNA Technology, 플라스미드 (Plasmid) DNA 분리, 2013.12.03
https://m.blog.naver.com/nanohelix/7018038572
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DNA를 변형시키는 효소들은 magnesium과 같은 2가 이온을 필요로 하므로 EDTA 를 조금 넣어주면 이런 효소들로부터 DNA를 보호할 수 있습니다.
DNA가 눈에 보이기도 하고 양이 적으면 잘 보이지 않기도 합니다. 그러나 상당히 순수한 plasmid DNA가 분리
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DNA형테는 Vector형태이지만 잘려지고 나면 linear형태로 변하기 때문에 잘렸을때의 DNA size가 더 크게 나타나는 것으로 볼 수 있다. 실제로 우리가 사용한 pBluescript SKII(+)의 사이즈는 2.961kbp로 실험값과 거의 흡사하다. (1) 실험 제목
(2) 실험
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