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980, p 6380.
<5>, <6> M.J. Waring , "Complex formation between ethidium bromide and nucleic acids.", Journal of Molecular Biology 13 , 1965, (1): p 269282.
<7> Albert A-C, Spirito F Figueroa-Bossi N, Bossi L Rahmouni AR, "Hyper-negative template DNA supercoiling during transcri
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1. 주제
2. 실험목적
3. 실험원리(서론)
■ 제한효소
1) Type I restriction enzyme
2) Type II restriction enzyme
3) Type III restriction enzyme
■ 제한효소를 이용한 DNA의 절단
■ 전기영동 ( electrophoresis )
■ DNA 정량
(1) DNA의 농도측정 원리
(2)
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제한효소는 Xho Ⅰ → Nde Ⅰ → EcoR Ⅰ의 순서로 넣어준다.
DDW
8μl
DNA
7μl
10x H buffer
2μl
Enzyme
각 1μl
Total
20μl
Table 1. 반응 용액 만들기
(2) 37 ℃의 Incubator에서 1시간동안 반응시킨다.
(3) 전기영동기기에 Agarose gel을 넣고 TAE buffer (1X)를 gel이 잠길
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제한효소에 의한 DNA분자 내의 절단부위를 찾아내서 그림으로 표시해 놓은 것은 제한지도라고 한다. 제한지도를 작성하는 방법은 다음과 같다.
첫째, 선상 DNA와 원형DNA분자를 제한효소로 가수분해한 후 가수분해 산물을 전기영동 시켜 나타난
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DNA를 가수분해 하는 효소들이 많음에도 불구하고 실험을 하는데 tube의 뚜껑 안쪽을 손으로 만지는 등의 부주의가 있었다. 마지막으로 파라필름(기름종이)위에 여러번 피펫팅을 할 때 가수분해 효소가 첨가되었음을 예상할 수 있었다. 그 결과
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