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분해물로서 3'-디옥시리보뉴클레오티드를 생성한다. 최적 pH는 5.0이며, 소량의 Mg2+로 촉매되고, 아연 구리 등에 의해 저해를 받는다.
Ⅳ. 결론
핵산 조작에서 가장 중요한 도구는 DNA 및 RNA 의 구조를 일정하게 변화시키는 여러가지 효소와 제한
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980, p 6380.
<5>, <6> M.J. Waring , "Complex formation between ethidium bromide and nucleic acids.", Journal of Molecular Biology 13 , 1965, (1): p 269282.
<7> Albert A-C, Spirito F Figueroa-Bossi N, Bossi L Rahmouni AR, "Hyper-negative template DNA supercoiling during transcri
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제한효소는 Xho Ⅰ → Nde Ⅰ → EcoR Ⅰ의 순서로 넣어준다.
DDW
8μl
DNA
7μl
10x H buffer
2μl
Enzyme
각 1μl
Total
20μl
Table 1. 반응 용액 만들기
(2) 37 ℃의 Incubator에서 1시간동안 반응시킨다.
(3) 전기영동기기에 Agarose gel을 넣고 TAE buffer (1X)를 gel이 잠길
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을 이용한 것이다. 제한효소로 DNA분자를 가수분해하면 제한효소의 종류에 따라서 상보적 점성말단을 가지는 DNA절편이 생기기도 하고, 단면말단을 가지는 DNA절편이 생기기도 한다.
이와 같은 제한효소에 의한 DNA분자 내의 절단부위를 찾아내
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DNA를 사용한 vector의 개환, vector의 소형화나 복합체의 작성, 제한효소에 의한 절단 부위를 map한 제한지도의 작성 등에 쓰이고 있다
3. III 형 제한효소
Endonuclease활성과 methylase활성을 가지며, Mg2+, ATP와 SAM의 존재 하에서 DNA의 분해와 methyl화가
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