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크로마토그래피(affinity chromatography)를 이용하여 쉽게 분리할 수 있다. His-tag을 발현시킨 재조합 단백질이 포함되어 있는 단백질 시료를 Ni2+가 결합되어 있는 gel을 채운 컬럼에 통과시킨 다음 세척 완충액을 컬럼으로 흘려준다. 그러면 his-tag 재
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Affinity chromatography packing
3.3 Sample 준비
3.4 Sample loading
3.5 Resin washing
3.6 Sampling
4. Dialysis
4.1 Buffer 만들기
4.2 1,2 차 Dialysis
5. Bradford
5.1 Bradford
5.2 UV spectrophotometry
6. SDS PAGE
6.1 PAGE gel 조성 및 준
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크로마토그래피는 겔 여과 크로마토그래피(gel-filtration chromatography), 이온 교환 크로마토그래피(ion-exchange chromatography)와 친화 크로마토그래피(affinity chromatography)이다.
겔 여과 크로마토그래피(gel-filtration chromatography)
단백질을 그 크기와 모양
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chromatography
② affinity chromatography
③ ion-exchange chromatography
3) 5.3 전기영동 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?6
① SDS-polyacrylamide gel electro- phoresis, SDS-PAGE
② isoelectric focusing
4) 5.4
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gel-filtration chromatography)
① 크기와 모양에 따라 분리
② 분자량이 작을수록 이동속도는 느림
2) 이온-교환 크로마토그래피(ion-exchange chromatography)
① 전하에 따라 분리
② 음이온 또는 양이온 교환수지 이용
3) 친화성 크로마토그래피(affinity chroma
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