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1. 형질전환-박테리아 세포로 DNA 도입
2. 재조합 분자의 확인
3. 박테리아 세포로 파아지 DNA의 도입
4. 재조합 파아지의 확인
5. 비박테리아 세포의 형질전환
클로닝의 주요 목적
한정된 양의
출발 물질로부터
다수의 재조합
DNA 분자 형
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cillin) plate-저항성을 지니는 항생제를 포함하는 고체배 지-에 위의 혼합액을 적당량 pipette으로 떨어뜨린 후, Spreader로 골고루 도말하여 준다.
<Ligation DNA를 형질전환 하는 경우 배양액 모두를 도말하는데, 이 때 550㎕정도 되는 혼 합액을 모두
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DNA, nicked DNA등에 모두 작용할 수 있으나 E. coli DNA ligase 는 T4 DNA ligase와 비교할 때 blunt-ended DNA에 작용하는 힘이 약하므로 일반적인 유전자 재조합 과정에서는 T4 DNA ligase를 더 많이 사용하는 경향이 있다. intro..
형질 전환(transformation)
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DNA를 renature시키는 역할을 하기 때문에 첨가되지 않으면 정상적인 plasmid의 expression이 일어나지 못하기 때문이고, galctose가 첨가 되지 못하면 LacZ의 발현이 일어나지 않으므로 당연히 β-galact-
-osidase가 발현되지 않는다. 그리고 X-gal은 β-galactosid
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형질 전환 동물
미생물이나 식물체를 이용한 단백질의 생산은 근본적으로 한계가 있다. 이것은 미생물이나 식물체의 생리체계가 고등 동물과는 명백히 다르기 때문이다. 이 단점을 극복하기 위해 유전공학계는 동물을 숙주로 한 단백질이나
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