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1. Title: DNA sample PCR
2. materials: 2㎕ PCR buffer, 0.4㎕ dNTP(0.1㎕ each of dATP dCTP dTTP dGTP), 0.2㎕ primer (10㎕ each of primer, 0.1㎕ Taq polymerase, 16.3㎕ DW, 1㎕ template DNA, micro pipette, tip, micro tube
3. Purpose:
1) ds-DNA separation: high temperature (90도 이상) ss-DNA 로 분
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DNA양을 차차
줄여 반응을 최적화 한다.
- plasmid가 genomic DNA보다 훨씬 PCR이 잘되며 일반적으로 50-500bp 정도
의 길이가 가장 수월하게 증폭된다.
- Protease 같은 단백질이 sample DNA에 많으면 PCR을 시작하기 전에
에서 5분간 끓여 효소를 불활성화 한
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sample을 0.5 ml PCR tube에 준비한다.
- 각 tube에 PCR program[94℃ 2분, (94℃ 30초, 55℃30초, 72℃ 30초: 5 cycle), (94℃ 30초, 60℃ 30초, 72℃ 30초 : 20 cycle), 72℃ 5분]에 의한 PCR을 진행한다.
- 전기영동으로 결과를 확인한다.
Results
↑ Chromosomal DNA isolation of E.coli
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PCR(DNA 증폭시키는 과정)을 제대로 했는지 checking하는데 쓰임.
12가지의 DNA sample 로딩, 1~12번 DNA sample 순차적으로 분석.
◊ Lab-on-a-chip 제작 방법Ⅰ:PDMS Molding
a) SV-ξ coating on si wafer b)UV light exposing
c) SV-ξ developing d)PDMS moldin
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PCR은 매우 민감하다.
3. 실험기구 & 시약
① TE(tris EDTA) buffer
<↑EDTA>
DNA의 경우 pH8.0 / RNA의 경우 pH7.5 / DNA+RNA 경우 pH8.0
pH 8.0 : 100mM tris-cl (pH8.0) + 10mM EDTA(pH8.0)
Tris-cl(pH8.0) : trizabase 를 증류수에 넣고 pH8.0까지 HCl로 조절한다.
② DNA sample
③ Spectro
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PCR의 기본 원리
Watson, Baker, Bell, Gann, Levine, Losik // 2010년 2월 18일 // 왓슨의 분자생물학 6판//p746-748
Watson, Baker, Bell, Gann, Levine, Losik // 2010년 2월 18일 // 왓슨의 분자생물학 6판//p748 Abstract
Introduction
Materials and Methods
Results
Discussion
Disc
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경우 효소에 의해 다시 잘려, agarose gel로 전기영동 하였을 때 vector와 insert, 이렇게 2 band로 나오는 것을 이용한 것이다.
DNA
10㎕
10×H buffer
2㎕
NdeⅠ
1㎕
XhoⅠ
1㎕
DDW
6㎕
total
20㎕
다시 PCR로 확인해 보았다.
premix에 다음과 같이 넣고 PCR을 했다.
DNA
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샘플들의 순도는 80%임을 알 수 있었고, 멜론 종자의 순도검정시 DNA mar
ker를 이용하여 검정할 수 있다는 결론도 얻었다.
5. References
- 농림수산식품부(2008) 수박ㆍ멜론의 품종 지문화 연구 및 순도검정 마커 개발. 연구보고서 3-84
- 이계동(2003) 수
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DNA와 RNA의 차이점은 무엇인가요?
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바이오니아가 무슨 일을 하는 기업인지 알고 있는지?
6
우리 회사 제품을 써보셨나요?
7
연구하던 주제는 뭐였는지?
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Real time PCR의 원리에 대하여 설명하세요.
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사이버그린과 택맨프로브의 차이는 무엇인가
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PCR, Western-blot, 플라스미드 DNA 정제, 유전형질의 전환(Tranfomation), ELISA assay, transfection, 단백질추출, 약물효능평가, 동물실험을 진행...(이하생략) - 자기소개서
1. 동아ST를 선택한 이유와 입사 후 회사에서 이루고 싶은 꿈을 기술해 주세요.
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[다수를 잘 따르는, 그리고 잘 이끄는 녀석]
2. 자신이 가장 성취감 있게 완수한 일은 무엇입니까?
[제24대 총학생회 부회장]
3. 위니아만도에 해당 직무로 지원하게 된 동기는 무엇입니까?
[남다른 위니아만도 DNA를 물려받다]
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DNA입니다. 세계를 무대로 르노삼성자동차 영업 업무를 담당하는 저에게도 도전정신은 필수입니다. 글로벌 브랜드 삼성르노자동차를 만들기 위해 먼저 도전했던 선배들이 외롭고 힘든 개척자가 지녀야 할 도전정신을 이어받겠습니다. 저는
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DNA를 채취하여 가족을 찾을 때도 사용되고 있습니다. 이렇게 유전자의 감식의 중요성이 커지는 가운데 휴먼패스는 생명공학 기술을 연구 개발하여 많은 연구 인력을 배출하여, 국내 최대 1위 유전자 감식 연구소가 되었습니다. 이러한 유전자
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