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1. 날짜 : 2012. 04. 30
2. 제목 : Enzyme activity에 대한 온도의 영향
3. 실험 목적 : Lipase의 활성에 대한 온도의 영향을 알아본다.
4. 재료
시약 – 0.1 M sodium phosphate buffer solution, 10 mM p-nitrophenol butyrate, 6.2 mg/mL lipase solution
기구 –
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효소의 specific activity (U/mgenzyme )를 계산한다.
※ 실험 시 유의사항
- p-NPB는 광분해될 수 있으므로 호일로 감싸야 한다.
- 흡광도 측정할 때 UV-Vis spectrophotometer에 외부 빛이 들어가지 않도록 한다.
- Sampling할 때 정확한 흡광도 측정을 위해 cuvette
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효소의 specific activity (U/mgenzyme )를 계산한다.
※ 실험 시 유의사항
- p-NPB는 광분해될 수 있으므로 호일로 감싸야 한다.
- 흡광도 측정할 때 UV-Vis spectrophotometer에 외부 빛이 들어가지 않도록 한다.
- Sampling할 때 정확한 흡광도 측정을 위해 cuvette
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enzyme과 결합을 잘하고, product로 잘 간다고 볼 수 있다.
-중간과정에서 NaOH를 넣어주는 이유는 enzyme의 활성을 없애기 위해서이다. 시간이 지나면서 효소랑 기질이 너무 많이 결합을 하게 되기 때문에 흡광도가 너무 커져서 기계가 읽을 수 있는
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생각합니다.
9. 참고문헌 :
수업에 사용한 실험 매뉴얼
실험생화학, 탐구당
분석화학 - 5판 저자 : DANIEL C.HARRIS 출판사 : 자유아카데미
Expt 057 -- Enzyme Activity (http://chemmovies.unl.edu/chemistry/smallscale/SS057c.html)
http://www.cyworld.com/elinius
http://home.inje.
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activity with immortal cells and
cancer. Science 1994, 266:2011-2015.
3. Colgin LM, Wilkinson C, Englezou A, Kilian A, Robinson MO,
Reddel RR: The hTERTα splice variant is a dominant negative
inhibitor of telomerase activity. Neoplasia 2000, 2:426-432.
4. Ulaner GA, Hu JF, Vu TH, Giudice LC, Hoffman
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효소작용과 구조 .............................................9
2. 우레아제의 유전적특징 .............................................12
3. NixA와 니켈 수송 .............................................13
4. NikR의 조절기작 ....................
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