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Ligation을 한다는 것은 이미 Insert와 Vector을 제한 효소를 이용해서 자른 상태임을 의미하며, Ligation하기 위해서는 잘라준 Insert와 Vector를 정제하는 과정이 꼭 필요하다. 이유는 정제를 통해서 불필요한 요소들을 제거해주고 남아있는 제한효소를
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Ligation - DNA나 RNA의 끝을 이어주는 과정을 가리키는 용어이다.
Ligase - Ligation 에 이용되는 효소
DNA를 기질로 사용하는 ligase를 DNA ligase, 라 한다.
- T4, E. coli ligase
RNA를 기질로 사용하는 ligase를 RNA ligase라 한다.
RNA ligase는 single strand의 DNA 또
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sphodiester결합을 촉진키는 기능을 하는 ligase를 이용하여 DNA상의 nick을 공유결합적으로 연결한다.
(3) 실험 원리
① Ligation : DNA나 RNA의 끝을 이어주는 과정을 가리키는 용어이다. 이 반응에 이용되는 효소를 ligase라 하며 DNA를 기질로 사용 하는 l
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해서 세포 속으로 DNA가 들어간 세포만을 선별하는 것을 selection이라고 한다. Vector란 무엇이며 어떤 역할을 하는가
DNA ligation이란?
DNA ligase 란?
Ligation reaction 과정
Ligation reaction에 영향을 주는 factor
ligation이 잘 안될 때?
T-vector 란?
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실험목적
제한효소에 의해 잘라진 필요한 부분의
Insert와 Vector의 결과를 전기영동을
통해 확인한 후 Ligase를 통해서 Insert
와 Vector를 붙여주는 것이 목적.
실험원리
Ligation
DNA나 RAN의 끈을 이어주는 과정을
가리키는 용어이다.
이 반응에
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ligation하기 전에 plasmid랑 삽입하고자 하는 gene을 모두 같은 restriction enzyme으로 처리해 주면, 대부분 sticky end를 만들기 때문에 plasmid와 gene 사이에 H-bond가 생긴다. 그래서 2개의 nick을 가진 원형 plasmid를 만들게 된다. 이때 ligase가 ATP를 이용하여 n
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