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해서 세포 속으로 DNA가 들어간 세포만을 선별하는 것을 selection이라고 한다. Vector란 무엇이며 어떤 역할을 하는가
DNA ligation이란?
DNA ligase 란?
Ligation reaction 과정
Ligation reaction에 영향을 주는 factor
ligation이 잘 안될 때?
T-vector 란?
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사전)
핸드 아웃, 생물 실험, colony over-expression(5월 4째주 실험 예정)
http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_molecular/gene_cloning_18.htm 1.Introduction
(1) ligation
(2)Transformation of E. coli
2.Material
3.Methods
⑴ Ligation
⑵ Transformation
4.Result
5.Discussion
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목적
Gene cloning
Transformation
유전물질 디옥시리보핵산(deoxyribonucleic acid/DNA)이 단백질 등과 결합하지 않은 노출된 형태로 미생물 세포 사이에서 전달되는 과정 중 하나
Agarose gel 전기영동
Agarose gel에 DNA와 loading dye를 넣고 전기를
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ligation이 된 것을 볼 수 없었다. 하지만 2Unit을 넣었을 때에는 5분과 45분 모두 ligation이 된 것을 확인 할 수 있다. 따라서 제일 효율적인 실험을 하려면 2Unit을 넣고 5분만 시간을 주어도 됨을 알 수 있다.]
6. Reference
분자생물학 제2판 / 박상대 /
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ligation 및 transformation하는 과정이었다. 지난 시간에 결과로 나왔던 PCR product를 insert로 넣었기 때문에 조마다 양을 다르게 하여 ligate를 만들었다. 우리조의 insert 농도는 7.88 ng/ul 이었는데, insert size와 vector size의 관계를 비교해서 적정한 insert 양
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생물학 6판//p748
따라서 이번 실험을 통해서 연구하고자 하는 DNA fragment를 숙주로부터 뽑아내고, 증폭하고, 안전한 장소에 보관 하는 실험 기술을 배울 수 있었다.
Reference
MicrobeWiki // 2014.10.28. // Fusarium graminearum // MicrobeWiki // microbewiki .kenyon .edu
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