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western blotting에서 발생된 빛은 고정된 항원에 도달하고 이것이 사진으로 검출되는 것이다.
※ 1차 항체의 affinity와 specificity가 좋다면 1차 항체에 직접 peroxidase나 alkaline phosphatase 등의 효소를 직접 cross-link하여 사용해 볼 수도 있을 것이다.
5. Ref
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하여 그 다른 동물에게도 혈철을 얻어낸다. 동물 1에서 얻은 혈청에는 primary Antibody가 들어있고, 동물 2에서 얻은 혈청에는 동물1의 protein에 결합하는 secondary Antibody가 들어있어 항체를 얻을 수 있다. western blotting에서 이런 두 단계의 Antibody를
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CREB(대장균 CREB)
동일한 위치(약 43kd)에서 띠 관찰
양 세포에서 상당히 많은량의 CREB 발현 의미
1. 원리
2. 용도
3. 방법
4. 참고사항
5. 실험절차
1. 원리
2. 방법
3. 용도
4. 참고사항
5. 사용증례
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5ug/ul
우리 측정한 : OD값 0.425 -> protein 4.25ug/ul
protein 20ug을 넣어야 하므로, 20ug : X ul = 4.25ug : 1ul So, X ≒ 4.7ul
6. Reference - 각주 참고 1. Introduction “western blot에 대해..”
2. Materials & Methods
3. Result
4. Discussion
5. Note
6. Reference - 각주 참고
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예를 들면 염색을 하기 전에 20% sulphosalicylic acid에 의해 변성시켜 고정한 후 염색을 하거나 염색과 관련된 변성 용매에 의해 고정하여야 한다. 후자의 경우 대표적인 용액으로는 10%(V/V) acetic acid가 있는 0.25% Coomassie blue를 메탄올 수용액(1:1, V/V)
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