<실험> 웨스턴블롯팅 (Western blotting)

소개글

<실험> 웨스턴블롯팅 (Western blotting)에 대한 보고서 자료입니다.

목차

1. Introduction

2. Material & Methods

3. Results

4. Discussion

* ECL의 원리와 Enzyme과 antibody의 결합원리.

5. Reference

본문내용

법은 이보다 흔한 방법인 2차 항체가 효소로 표지되고 1차 항체에 대한 특이성을 갖고 있는 것이다. 이 경우, 항체가 고정된 항원에 결합한 위치에서 다중 효소 분자들이 localization으로부터 신호가 증대된다. 색원체 기질을 발광성 물질로 대체하면 감도가 더 증가될 수 있다. 발광성은 기질에서 전자들이 흥분하여 더 높은 에너지 상태로 되었다가 낮은 상태로 안정화될 때 나타난다. 우리가 실험한 것에서처럼 Mouse-HRP 가 차례로 luminol(발광물)과 같은 기질을 산화 시키고, 산화된 luminol은 빛 에너지를 방출하면서 바닥상태로 떨어진다. 단백질 western blotting에서 발생된 빛은 고정된 항원에 도달하고 이것이 사진으로 검출되는 것이다.
※ 1차 항체의 affinity와 specificity가 좋다면 1차 항체에 직접 peroxidase나 alkaline phosphatase 등의 효소를 직접 cross-link하여 사용해 볼 수도 있을 것이다.
5. Reference
http://biosci.snu.ac.kr/
http://urizip.x-y.net/b-western.htm
http://www.immunoblot.com/westblot.htm
http://www.elpisbio.com/html-sub/protocols/western%20blotting.htm
http://www.ajou.ac.kr/%7Ebiotech/study/western/western%20blot.htm
http://home.pusan.ac.kr/%7Emolbio99/western.htm

키워드

Western blotting,   SDS-PAGE,   단백질분리,   Immunoblotting,   HRP 효소,   웨스턴블롯팅,   ECL