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푸른 색이 되고, DNA가 재조합된 박테리아의 conony는 LacZ가 망가져서 기능하지 않아 X-Gal이 그대로 남아 있어서 흰색 colony가 된다. 이렇게 색깔의 차이로 DNA가 plasmid 에 들어가서 세포 내에서 증폭되어 기능하는지 알 수가 있다.
그림에서 설명
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stion 경우 젤 전기영동으로 제한효소에 의해 잘라지지 않았다. 그 원인으로 RE digestion 과 elution 순도 & 양 competent cell효율 등에서 착오가 생겼을 것으로 판단된다.
참고문헌
http://www.gbiosciences.com/EducationalProducts/Plasmid-Isolation-(Alkaline-Lysis).aspx
http:
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ice, Principles of Life, Sinauer Associated, Inc & W.H. Freeman and Company, 2012, p.231-235, 244-262
2) Birnboim, H.C. and Doly, J. A rapid alkaline extraction procedure for screening recombinant plasmid DNA. Nucleic Acids Research 7, 1979, p.1513-1523
3) Joseph Sambrook, David W. Russell, Molecula
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Plasmid DNA (Hemoglobin)를 직접 transformation 해보았고, 결과로써 LB Plate에 형성된 colony를 확인하였다. 1. 주제
2. 실험목적
3. 실험원리(서론)
■ Transformation (형질전환)
■ Competent cell (수용세포)
■ Vector (벡터)
■ 플라스미드 (Plasmid)
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screening 과정을 거처 bacterial colony로부터 plasmid를 추출했을 때, 이 recombinant DNA가 제대로 된 insert를 가지고 있는지를 확인하기 위한 enzyme mapping 방법을 구체적으로 제시하시오. 즉, 어떤 enzyme을 어떤 조건에서 사용할 것이며, 예상되는 fragment size
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