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기질의 결합자리수도 하나 이상 이다. 다른 자리입체성 효소는 일반적으로 크고, 복잡한 구조를 가지고 있다. 비조절효소와 다른 자리입체성 효소의 다른점은 속도론 적인 성질이다. 다른 자리입체성 효소의 반응속도와 기질농도의 관계는
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enzyme의 활성을 없애주기 위해 NaOH를 넣어준다. NaOH를 넣기 전에 1min씩 똑같이 반응을 해야하기 때문에 효소를 넣은 순서대로 NaOH를 넣어준다.
③ 410nm에서 흡광도를 측정한다.
④ 각 기질농도에서 단위시간 동안의 흡광도 변화로부터 초기속도
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효소의 활성을 떨 어뜨린다.
(3) Noncompetitive Inhibition (비경쟁적 저해)
1/V
k1
k2
E + S
E S
→
E + P
k-1
+
kI
I
→
E I
1/[S]
반경쟁적 저해는 저해제가 [ES]complex에만 결합하는 현상이다.
(4) Substrate Inhibition (기질저해)
기질저해는 높은 기질의 농도에서 기질
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기질-다효소 반응과 같은 보다 복잡한 효소-기질간 상호작용이 일어날 수 있다. 효소는 기질과 결합할 수 있는 활성부위의 숫자가 일정하기 때문에 높은 기질농도에서는 활성부위 모두가 기질과 결합하여 효소가 포화되는 상태가 된다.
효소
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Enzyme activity 및 효소반응 초기속도를 구한다.
(9) Lineweaver-Burk plot을 이용하여 1/V vs. 1/S curve를 작성한다.
(10) Michaelis-Menten equation을 구한다.
5. 실험참고사항
(1) 선택한 기질의 농도가 너무 낮거나 높으면 기질의 농도와 반응속도의 역수(1/V vs. 1/S)
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농도를 참고 해서 맞춰야 한다. ligation이 잘 되었는지 확인하기 위해서는 cloning 까지 마쳐야 한다. cloning이 금방 끝나는 것이 아니라 오래 걸린다. 또, 제대로 colony가 뜨지 않았을 때는 ligation이 문제인지 cloning 어떤 과정에 문제가 있는 지 명확
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기질유사체 부신피질
In-111 antibody 면역반응 특정세포
Tc-99m DTPA 사구체여과 신장
Tc-99m MDP 화학적흡착 뼈 -뇌 신티그라피
-뼈 신티그라피
-삼상골 영상기술
-위장관 출혈 신티그라피
-혈관종 신티그라피
-간 신티그라피
-비장 신티그라
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효소를 처리 한것과 하지 않을 것을 사용하였으므로 같은 크기의 DNA라는 것을 알 수 있고 따라서 전기영동 결과 나타난 이동속도의 차이는 제한효소에 의해 변형된 구조차이에 의한것이라고 결론 내릴 수 있다. 보통 자연계에서 플라스미드 D
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효소들, 특히 제한효소와 DNA리가아제에 관한 연구 등에 의하여 발견된 업적들이 직접 기여했지만, 그 이전부터 꾸준히 계속되어 온 유전과 분자생물학에 대한 연구의 결과가 바탕이 되었다.
이 기술을 이용한 유전공학은 특정한 유전자를 분
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