유전학 과제 및 실험 레포트

목차

◎ 배지의 종류와 제조 방법
◎ 박테리아
유전학 및 실험1:배지 만들기
1.액체배양과 고체배양의 차이
2.순수배양을 하는 이유와 방법

본문내용

지 않도록 주의한다.
: 사면 배지 조제 시 멸균시킨 시험관을 너무 경사지거나 배지양이 많아서 배지가 시험 관 입구근처에 도달하지 않도록 한다.
1.액체배양과 고체배양의 차이
액체 배지 멸균한 상태라면 밀봉하여 4'C 에 보관한다 사용시마다 오염이 안되게만 주의만 하면 됨
고체배지 만들때 오염 안돼게 잘 만들어 디쉬를 랩으로 싸아 냉장고에 보관한다.오염원의 접근을 사전에 잘 막으면 오염될 일이 없음
배지의 형태를 결정하기 위해서는 다음의 사항을 고려한다. 식물체의 생육에 적합한 배지(pineapple과 banana는 액체배지에서 생육이 좋음)를 고려, 액체배지에서는 통기(aeration)방법, 삼출물(exudate) 및 흡수율, 성장과 기관분화의 특성, 유리화 등에 대한 문제점을 검토한 후 액체배지 또는 고체배지에서 배양할 것을 결정한다.
2.순수배양을 하는 이유와 방법
순수배양->세균을 한천배지 등의 배지에서 단일종만이 존재하는 상태에서 배양하는 일.
이 방법은 L.파스퇴르와 R.코흐에 의하여 확립된 것으로, 어떤 세균 원생동물 곰팡이 등을 병원체로 확정하기 위해서는 다른 종류가 혼입되지 않는 상태에서 실험할 필요가 있다. 또, 일반적으로 미생물의 생리학적 연구에도 연구대상을 순수하게 분리할 필요가 있고, 특히 항생물질을 연구할 때는 절대적으로 필요하다.
다 세포동물에서 기관의 일부나 특수한 배(胚) 조직 등을 배양하는 조직배양과 기관배양이 있는데, 근래에는 체세포를 하나하나 분리하여 한 종류의 세포를 세균의 순수배양과 같이 배양할 수 있게 되었다. 이것에 의하여 세포의 유전학적 연구를 하거나, 정상 세포에서 암화(癌化)하는 문제, 또 이 분리한 살아 있는 세포속에서만 증식하는 바이러스 연구 등에 응용하고 있다.
예:그람 염색법을 시행 한후에 E-coli는 탈색이 되어 붉은 색으로 변하였고 B-subtilus는 탈색되지 않고 보라색을 유지하고 있었다.
그람 염색법은 Eubacteria의 동정에 대단히 중요한 특이한 염색과정이다. 그람 염색법을 시행하면 음성세균으로 알려진 몇몇 세균들은 유기용매에 의해서 완전히 그리고 재빨리 탈색되고 양성세균들은 탈색되지 않는다. 그러므로 결론적으로 E-coli는 그람 negative이고 B-subtilus는 그람 positive라고 할 수 있다.
그람 반응의 원리는 간단하다. 그림에서와 같이 그람 양성세균은 두꺼운 peptidoglycan layer와 풍부한 teicoic acid로 이루어져 있어서 그람 반응에서 쉽게 탈색되지 않는다. 그러므로 crystal violet이 세균내에 남아 있어서 보라색을 띤다. 그람 양성세균의 세포막이 탈색제가 세포질에 작용하는 것을 방지하는 장벽을 만들어서 염료복합체가 용해되는 것을 막아주는 것이다.
그람 음성세균은 peptidoglycan layer가 단일층으로 되어 있고 세포벽이 지방성분인 lipopolysaccharide로 되어 있다. 이러한 높은 지질 함량때문에 세포막의 지질이 알콜이나 아세톤에 의해서 쉽게 용해되어 버리고 탈색제가 쉽게 내층의 세포질 속으로 들어가서 염료복합체를 용해시켜 버린다. crystal violet이 쉽게 탈색되어 대조 염색약인 safranin으로 염색되어 붉은 색을 띠는 것이다.
그람 staning에 의한 분류에 의하면 대부분의 살아있는 세포는 양성이며 음성세균중에 효모 박테리아 몇몇의 곰팡이가 있다고 한다.
그람 양성 : Bacillus Subtillus, Staphtlococcus, Micrococcus, Streptococcus, Faecalis
그람 음성 : 대장균, 폐렴간균, 살모넬라, 임균, 수막염균, Shigella, Enterobacter

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