E.coli로부터의 plasmid의 분리 및 Restriction Digestion

소개글

E.coli로부터의 plasmid의 분리 및 Restriction Digestion에 대한 보고서 자료입니다.

목차

1. 실험 제목

2. 실험 날짜

3. 실험 목적

4. 실험 이론과 원칙

5. 실험 재료와 방법

6. 실험 결과

7. 고찰과 결론

본문내용

0~74℃에서 polymerase에 의해 DNA를 합성한다.
위 3개 단계를 한번 반복하면 반복하기 전보다 2배의 DNA를 얻을 수 있다. 이 과정을 여러 번 반복하여 소수의 DNA를 증폭시킬 수 있는 것이다.
5. 실험 재료와 방법
① 실험 재료
Agarose gel, EtBr, TAE buffer, loading buffer, tray, micropipet & tips, tubes, marker
② 실험 방법
PCR로 얻어낸 sample을 agarose gel에 loading 하여 electrophoresis 한다.
6. 실험 결과
Electrophoresis의 결과로 다음 사진과 같은 결과를 얻었다.
위 사진에서 보다시피 오른쪽의 6개가 실험 결과인데, 왼쪽의 두 종류의 band는 DNA에 아무 처리도 하지 않은 것이고, 가운데 두 종류는 PCR로 증폭시킨 sample에서 DNA가 있는 것(왼쪽)과 없는 것(오른 쪽)이며, 마지막으로 오른쪽 둘은 DNA에 제한효소 처리를 하여 원하는 크기로 자른 것이다.
7. 고찰과 결론
- 첫 실험에서는 결과가 잘못 나와 재 실험을 하였으나 결과가 정확하게 나오지 않았다. 보다시피 DNA를 제한효소로 처리한 sample에서 band가 두 가지로 분리되어 나와야 하지만 여러 band로 분리되어 나왔으며, 첫 두 개 sample에서는 아예 DNA가 detecting 되지 않았다.
- 두 번째 실험에서의 miniprep 과정에서 문제가 생긴 것 같다. Supernatant를 제거하고 침전물을 얻어내는 과정에서 실수가 있었던 것 같다.
8. 참고문헌
① 대한 생화학 실험

키워드

plasmid,   플라스미드 분리,   restriction,   PCR